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目的:研究在支气管哮喘豚鼠肺中有丝分裂原激活蛋白激酶(MAPK)- AP-1(active protein-1)信号通路对γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的作用及糖皮质激素和蛋白酪氨酸激酶(PTK)抑制剂木黄酮对其的影响。方法:成年雄性豚鼠40只,随机分成对照组(A组)、哮喘组(B组)、地塞米松组(C组)和PTK抑制剂木黄酮组(D组),每组10只,以腹腔内注射联合雾化吸入卵清蛋白复制哮喘模型。C组、D组动物腹腔内分别于每日雾化前注射地塞米松1.5mg/kg和木黄酮15mg/kg,连续14天。对照组以生理盐水替代卵蛋白同步实验。测支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞总数及分类计数;测细支气管炎症细胞浸润及气道重塑指标,测BALF和肺组织中还原型谷胱甘肽(GSH)和总谷胱甘肽量;测磷酸化细胞外激活蛋白激酶(p-ERK)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)、磷酸化P38(p-P38)、AP-1和γ-GCS在肺组织中的表达(免疫组化);测p-ERK、p-JNK、p-P38、ERK、JNK、P38和AP-1在肺组织中的表达(Westernblot);测γ-GCS-h mRNA和AP-1mRNA在肺组织中的表达(RT-PCR);测γ-GCS的活性(双酶法)。结果:1.B组BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞(EOS)比例较A组明显增高;与B组比较C组、D组明显降低,C组与D组无明显差异。2.HE染色,B组与A组比较,细支气管存在明显EOS和淋巴细胞浸润及气道重塑;与B组比较,C组和D组的炎性细胞浸润减少,气道重塑减轻。3. B组、C组和D组BALF和肺组织中总谷胱甘肽和GSSG较A组有明显增高,GSH/GSSG较A组明显降低;与B组比较,C组和D组总谷胱甘肽和GSSG下降,GSH/GSSG明显升高;GSH在A组、B组、C组和D组之间差异无统计学意义。4.免疫组化结果显示B组p-ERK、p-P38、p-JNK、AP-1和γ-GCS表达较A组均增高;与B组比较,C组p-ERK、p-P38、p-JNK、AP-1和γ-GCS均明显下降, D组p-ERK、AP-1和γ-GCS表达水平显著下降;B、D组间p-P38和p-JNK表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。Western blot显示在B组豚鼠肺组织中p-ERK、p-JNK、p-P38和AP-1较A组表达均明显增加;与B组比较,C组p-ERK、p-JNK、p-P38和AP-1表达均下降,而D组p-ERK和AP-1表达下降;B组、D组p-P38和p-JNK表达无明显变化;总ERK、总JNK、总P38在A组、B组、C组和D组之间差异无明显统计学意义(P>0.05)。5.4组动物肺组织中γ-GCS-hmRNA和AP-1mRNA表达水平变化趋势与蛋白质表达趋势一致。6.直线相关性分析显示:在BALF中总谷胱甘肽、GSSG与总细胞数、E%呈高度正相关,GSH/GSSG与总细胞数、E%呈高度负相关;在肺组织中总谷胱甘肽、GSSG与AP-1蛋白量、γ-GCS-h mRNA、γ-GCS蛋白量呈高度正相关,GSH / GSSG与AP-1蛋白量、γ-GCS-h mRNA、γ-GCS蛋白量呈高度负相关;在肺组织中p-ERK、p-JNK、p-P38与AP-1蛋白量、γ-GCS-h mRNA、γ-GCS-h蛋白量呈高度正相关,在肺组织中AP-1蛋白量表达与γ-GCS-h mRNA、γ-GCS蛋白量表达呈高度正相关。结论:1.在哮喘豚鼠模型肺组织中,氧化应激可能通过AP-1上调γ-GCS基因的表达水平,而AP-1的表达上调可能是p-ERK、p-JNK和p-P38共同作用的结果。2.在哮喘豚鼠模型肺组织中,糖皮质激素可能通过抗氧化应激、抑制ERK、JNK和P38的活性,从而下调AP-1蛋白质表达。而木黄酮可能通过降低肺内氧化应激和抑制ERK活性而下调AP-1蛋白质表达。