农杆菌介导Lat52-DTA基因转化拟南芥菜

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该实验的目的是通过原位真空渗透转化法得到转基因的拟南芥(Arabidopsisithaliana)植株,以验证启动子Lat52的特异表达性和为进一步的研究花粉发育过程中营养细胞和生 殖细胞的互作提供材料.农杆菌介导的原位真空渗透法已成为转化拟南芥菜的常规技术.理论上其适合用于任何离体再生困难的植物.该实验利用在花粉营养细胞中特异性表达的启动子Lat52与白喉毒素A链基因构基因构建重组质粒后,运用农杆菌介导的原位真空渗透法转化拟南芥菜,共处理了三批,约120株.分别收集种子后,用抗生素进行抗性筛选,得到抗性 株103株.通过Lat52启动子的特异引物的PCR扩增反应,初步证明在抗性株中有4转化植株.对抗性后代的进一步的分子杂交验证工作和花粉中营养细胞和生殖细胞的互作的研究尚在进行之中.
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