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免疫活性肽是多肽类物质中比较特殊的一类,它是细胞信号传递物质,存在于生物体内,行使免疫功能。它具有通过刺激机体淋巴细胞(简称为T细胞)使之快速增殖,且增强巨噬细胞在生物体内的吞噬作用。这些作用使得机体对外界病原体感染的抵御能力获得了提高,并且具有抗肿瘤功效。胸腺法新(Thymalfasin,简写为Tα1)最早是人们在动物胸腺素组分中发现一类特殊的物质,它的序列结构中包含二十八个氨基酸残基,分子量为三千一百零八,是一种具有免疫活性的多肽。药理作用,一方面它通过刺激淋巴细胞丝裂原促进T细胞成熟并促使其分泌各种淋巴因子,这些淋巴因子和人体免疫系统相关,如干扰素γ(γ-IFN)、白介素2(IL-2)等。另一方面它促使NK细胞聚集,增加细胞毒水平。Tα1在临床上也获得了许多成功的应用,如针对恶性肿瘤、免疫缺陷病、自身免疫病及慢性感染的治疗。Tα1是非常好的免疫活性肽,但是大多数肽类药物一样,在临床治疗时有许多局限。其中酶解稳定性差就是导致之一问题的原因之一,因此如何解决这一难题成为一个重要的课题。随着研究的推进,多种解决方案被发现,其中一种方案就是修饰肽类药物自身的结构,增加其酶解稳定性,并且保持或增强肽的活性。本课题研究的是经β-氨基酸修饰取代而改造后的多肽药物,简称为β-肽。β-肽与天然存在的α-肽类似,同样具有如α螺旋、β折叠及转角这些空间二级结构,与α-肽相似的结构使其生物学活性也与对应的α-肽相似。β-肽特殊性表现在对多肽酶以及代谢转换酶稳定,可以抵抗生物体内酶的降解,使肽类药物在生物体内的半衰期延长,进而提高了其生物利用度,因而β-肽在药物设计领域占有重要地位。本论文的研究内容是含有β-氨基酸Tα1模拟物(简称STα1)的制剂研究。STα1系利用固相合成法合成的由28个氨基酸组成的免疫活性肽,即以Tα1为模板,在其结构基础上,为了增加其体内酶解稳定性进行了β氨基酸替换,以β-X替换其第2、6、14、20位的氨基酸。本文主要是对STα1制剂的处方进行研究、对制剂的生物学活性进行测定,并以Tα1为对照对其制剂的初步药效学进行评价。本研究组参照文献报道,对STα1冻干粉针制剂的赋形剂、pH、缓冲体系进行了研究筛选,通过有关物质含量的变化对不同的处方进行了评价,最终我们确定的制剂处方是右旋糖酐与蔗糖作为赋形剂,枸橼酸-枸橼酸钠作为缓冲盐,且pH为6.0~7.5。该处方在冷藏条件下可以稳定的储存一年以上。通过与日达仙(Tα1)对照,用体外玫瑰花结实验对STα1制剂体外活性进行了研究,研究结果证实STα1低浓度范围活性明显优于Tα1,且STα1最佳浓度(1.5ug/ml)约为Tα1的最佳浓度(6.25ug/ml)的四分之一。在初步药效学研究中,在荷lewis肺癌小鼠模型上,STα1能够辅助化疗药物(顺铂)对肿瘤有明显的抑制作用,这个作用体现在抑瘤率上,进一步数据表明STα1是通过对脾脏系数和免疫因子CD4+/CD8+的影响而产生的作用。实验证明STα1对顺铂抗小鼠lewis肺癌的治疗是有效的。本论文的研究结果为其它肽类药物开发提供了借鉴,为具有自主知识产权的1类新药STα1的开发奠定了基础。