论文部分内容阅读
本文从天然药物原料-罗汉果中分离、纯化了其中主要药物功能成分-罗汉果甜苷。通过反相高效液相色谱(RP-HPLC)定量分析了罗汉果甜苷V在所提纯总苷中的含量;将提纯的罗汉果甜苷加到卷烟后,经吸烟机对烟气捕集、利用RP-HPLC分析主流烟气粒相物中罗汉果甜苷V的含量,并与对照烟样对比分析,确定了主流烟气粒相物中的药物功能成分-罗汉果甜苷V的转移率;通过热裂解试验,用GC-MS定性分析了罗汉果甜苷在高温下的成分;将分离提纯的产品应用于卷烟中,通过评吸确定了罗汉果总苷的最佳用量和作用效果。
具体工作内容包括:
1.罗汉果甜苷的萃取和纯化
以罗汉果为起始原料,用65%乙醇提取罗汉果总苷,将粗制的总苷过D-280强碱性阴离子树脂对其脱色,以AB-8大孔吸附树脂对其中的总苷进行吸附收集,确定的工艺条件为:粗制罗汉果总苷脱色时,脱色溶液的pH值以10,浓度以8-10mg/ml为适宜; AB-8树脂的堆积密度是0.98g/ml,AB-8树脂对罗汉果总苷的饱和吸附量是19.8mg/ml;优选的洗脱条件为依次用蒸馏水清洗碱和无机盐等杂质,最后以50%乙醇收集洗脱液。甜苷收率为42%(以罗汉果计)。
2.定量分析了罗汉果甜苷V在所提纯总苷中的含量
采用RP-HPLC法分析罗汉果甜苷V,具体分析条件为:柱型:Waters ODS C18柱(十八烷基硅烷) (250x4.6mm 5um,美国waters科学仪器公司);流动相:乙腈:水=23:77(V/V);流速:1.0ml/min;柱温:30℃.。线性回归方程:Y=141374.82171×X-20775.65968,线性相关系数是0.9993。对该方程的线性范围进行考察,结果表明罗汉果甜苷的进样量在0.025ug-30ug时均有良好的线性关系。该方法的最低检出限是25ng。实验测得所分离的罗汉果总苷的纯度是67%。
3.从甜苷中单离了罗汉果甜苷V
把脱色、吸附后的罗汉果总苷过柱层析分离单体,以氯仿:甲醇:水为6:4:1为洗脱液,薄层色谱检验洗脱液、通过反复柱层析富集Rf相同的单一组分。并通过红外光谱和高效液相色谱对所分离和提纯的罗汉果总苷、罗汉果甜苷V进行了定性、定量分析。所提纯的罗汉果甜苷V的纯度是92%。
4.定量测定了罗汉果甜苷V的转移率和截留率
将罗汉果甜苷加入到“金许昌”卷烟后经吸烟机抽吸,以滤嘴和剑桥滤片捕集主流烟气粒相物,对所捕集得到的烟气进行适当处理后,在前面建立的反相高效液相色谱法分析罗汉果甜苷V的基础上定量分析主流烟气中罗汉果甜苷V的转移率、及滤嘴中罗汉果甜苷V的截留率。结果分别是15.0%和7.6%,该方法的重现性较好。
5.初步研究了罗汉果甜苷的高温裂解产物
通过热裂解GC-MS技术定性分析罗汉果总苷的热裂解成分。实验图谱及资料证明罗汉果总苷裂解时,随着裂解温度的升高,裂解产物的数量变大,成分变复杂。可以推断罗汉果甜苷不会在高温下分解出有害物质稠环芳烃如苯并[a]芘等。
6.研究了最终产品在卷烟中的应用
按不同比例所分离的罗汉果总苷添加到“金许昌”牌卷烟中评吸。结果表明:添加最佳用量为5/1000,即每克烟丝含100μg罗汉果总苷。添加罗汉果甜苷后对烟气的效果是:烟气协调性好、无苦味、药味、干燥感下降、余味舒适、干净、甜润度明显增加。