从分蘖葱头中提取抗氧化活性成分的研究

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分蘖葱头属于百合科葱属植物,其食用部分主要为膨大的鳞茎、叶鞘和嫩叶等,富含糖类、蛋白质及各种矿物质,味辛而甘,具有驱寒、抗菌、抗病毒、抗肿瘤和改善心血管系统活性的功效。本论文首先采用抗氧化试剂盒对分蘖葱头的活性成分进行系统筛选,选出抗氧化活性能力较高的活性成分—黄酮类化合物,并对黄酮化合物的最佳提取与纯化工艺和结构进行了系统研究,最后对其抗氧化及稳定性进行了研究。1分蘖葱头中抗氧化活性成分的筛选研究首先通过系统定性试验的手段对分蘖葱头中所含的活性成分进行了分析,确定了分蘖葱头中含有黄酮类、酚类、有机酸、挥发油等七种活性成分;然后通过测定五种不同极性的溶剂提取物的总抗氧化能力,发现主要的抗氧化活性成分集中在醇提取物和石油醚提取物中;接着又通过石油醚、乙酸乙酯和正丁醇对醇提物进行萃取,结果表明抗氧化活性较高的物质集中在正丁醇萃取物中;最后通过对正丁醇萃取物上柱,用减少极性梯度的乙醇溶液进行洗脱,并检测各阶段产物的总抗氧化能力和其中的活性成分,结果发现总抗氧化能力最高集中在体积分数为40%和60%的乙醇洗脱液中。2分蘖葱头中黄酮活性成分的提取纯化研究首先通过单因素和响应面试验对分蘖葱头总黄酮的提取工艺进行优化,确定最佳工艺条件为乙醇浓度70%,料液比为1:17,超声波时间为48min,浸提温度为60℃,超声功率为450W,浸提时间为2.5h,总黄酮得率可达到3.36%。然后对其进行静态和动态吸附考察,并确定了纯化总黄酮的最佳工艺操作:最佳上样浓度为3.0~6.0mg/mL,上样流速为0.5mL/min,洗脱溶剂为60%乙醇,洗脱流速为1.0mL/min;并对该纯化后总黄酮的含量进行测定,其达到54.15%,回收率达到90.56%。3分蘖葱头黄酮活性成分的结构鉴定通过紫外和红外可见光谱扫描测定,分蘖葱头样品在369nm和288nm处有最大吸收峰,各功能团引起的振动特征吸收峰大致符合山奈酚和槲皮素的结构;最后通过HPLC测定,从而进一步验证了分蘖葱头黄酮精制样品中存在槲皮素和山奈酚等黄酮类化合物,其中槲皮素含量为47.16%,山奈酚含量为29.13%。4分蘖葱头黄酮活性成分的抗氧化研究通过分蘖葱头黄酮溶液对超氧阴离子(·O2-)的清除能力进行测定,结果显示对超氧阴离子的清除率达到84.37%;然后发现分蘖葱头黄酮溶液对·OH的清除作用随稀释度的增加而增强;最后探究了温度和光照对抗氧化稳定性的影响。
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