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脓毒症是导致危重病人死亡的主要原因,但其发生机理目前尚未完全阐明。研究发现,神经-内分泌-免疫网络中的下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴在脓毒症发生发展过程中发挥着关键作用。脓毒症时出现HPA轴爆发性活化,这种失衡状态与脓毒症的发生发展呈正相关,蛋白酶抑制剂乌司他丁可抑制HPA轴的爆发性活化,然而其具体的分子机制还不完全清楚。JAK-STAT信号转导途径在细胞的增殖、分化、凋亡、炎症反应、免疫调节等方面充当关键角色,它广泛参与细胞因子的信号转导,其中,IL-6/STAT3备受关注。已知在慢性冷刺激作用下IL-6、信号转导子与转录激活子3(STAT3)在下丘脑中表达,并调节促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)的转录,影响HPA轴的活性。那么脓毒症状态下出现的HPA轴爆发性激活是否与IL-6/STAT3信号通路有关呢?乌司他丁是否通过抑制IL-6/STAT3信号通路来改善HPA轴的过度激活呢?目前尚无相关研究报道。本研究采用大鼠盲肠结扎穿孔术(CLP)复制严重腹膜炎所致脓毒症模型对此进行初步探讨。将健康清洁级雄性Wistar大鼠32只,随机分为正常对照组(Control组)、假手术组(Sham组)、盐水治疗组(NS组),乌司他丁治疗组(UTI组),每组8只。采用CLP法建立脓毒症动物模型,NS组于行盲肠结扎穿孔术后立即经腹腔注射0.9%NaCl 10ml/kg,UTI组于盲肠结扎穿孔术后立即给予注射用乌司他丁治疗10万U/Kg。各组大鼠均于术后6h采血2ml,并分离出下丘脑、垂体、肾上腺组织。大鼠一般状况观察:观察术后6h大鼠是否出现萎靡不振、嗜睡、寒颤、竖毛、眼角分泌物、腹水及腹腔肠管外观形态学改变;应用放射免疫法检测血浆中促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)浓度;应用RT-QPCR检测:下丘脑组织CRHm RNA、IL-6 mRNA、STAT3 m RNA、细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)mRNA水平,垂体组织阿片-促黑素细胞皮质素原(POMC)mRNA、IL-6 mRNA、STAT3 mRNA、SOCS3 m RNA水平,肾上腺组织il-6mrna、stat3mrna、socs3mrna水平。结果显示:1、sham组大鼠术后清醒较早,清醒后活动较灵活,剖腹未见腹水,无难闻的臭味,无肠管肿胀;ns组大鼠清醒时间延长,萎靡不振、活动明显减少、立毛、寒颤、呼吸频率增快、眼角有较多分泌物,开腹可见浑浊脓血性腹水,肠管肿胀,个别盲肠末端颜色暗黑坏死,有难闻的臭味。与ns组相比uti组大鼠一般状况较好。2、ns组血浆中acth、cort水平高于sham组(45.837±7.232vs.21.935±4.713;25.021±4.088vs.12.592±4.313,p<0.05);与ns组相比,uti组血浆中acth、cort水平明显降低,差别有统计学意义(24.636±5.866vs.45.837±7.232;19.892±4.770vs.25.021±4.088,p<0.05);而sham组血浆中acth、cort水平相比control组无统计学差异(21.935±4.713vs.19.704±3.472;12.592±4.313vs.12.486±3.523,p>0.05)。3、rt-pcr结果:与sham组相比,ns组大鼠下丘脑组织中crhmrna、il-6mrna、stat3mrna、socs3mrna表达明显增加(3.22±0.65vs.0.79±0.13;4.69±2.53vs.0.55±0.28;1.67±1.11vs.0.49±0.53;4.33±1.58vs.0.96±0.36,p<0.01);垂体组织中pomcmrna、il-6mrna、stat3mrna、socs3mrna表达明显增加(2.73±0.42vs.0.94±0.19;7.21±5.23vs.0.15±0.08;14.88±10.81vs.1.48±0.10;14.55±6.23vs.0.89±0.27,p<0.01);肾上腺组织中il-6mrna、stat3mrna、socs3mrna表达明显增加(72.44±62.35vs.1.05±0.56;4.60±0.96vs.0.17±0.08;8.56±2.83vs.1.21±0.46,p<0.01)。uti组和ns组比较:下丘脑组织中crhmrna、垂体组织中pomcmrna表达明显减少,差异有统计学意义(2.04±0.57vs.3.22±0.65,p<0.05;1.03±0.25vs.2.73±0.42,p<0.01),其余目的基因表达无明显变化(p均>0.05)。sham组和control组比较:下丘脑组织、垂体组织、肾上腺组织中各目的基因表达水平无明显差异(p>0.05)。综上所述,1.在脓毒症的早期阶段即出现hpa轴爆发性激活,其相关激素分泌节律发生紊乱,其发生机制可能与il-6/stat3信号通路的激活有关。针对il-6/stat3信号通路这一靶点进行干预,有望改善脓毒症状态下hpa轴的过度激活,为脓毒症的治疗提供新的思路。2.乌司他丁可以改善脓毒症大鼠的一般状况,抑制HPA轴爆发性激活,保护机体免受损伤,但其抑制HPA轴过度激活的具体分子机制还需进一步研究。