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原肌球蛋白(tropomyosin, TPM)是组成细胞骨架结构微丝的重要成分,主要调节肌细胞的收缩和非肌细胞的细胞骨架稳定性。以往的观点都认为这些TPM蛋白与多种良性肌肉病变的发生密切相关,比如重症肌无力和家族性肥厚性心肌病等。但近年,越来越多的研究开始关注TPM1在肿瘤的发生发展过程中的作用,进而发现TPM1在乳腺癌等肿瘤中扮演了肿瘤抑制基因(tumorsuppressor gene, TSG)的角色。这种抑癌作用具体表现在,TPM1参与了细胞变形、侵袭、迁移、抗凋亡等一系列恶性肿瘤的生物学行为。对其作用和调控机理的深入认识会使TPM1运用到肿瘤的诊断和治疗,并将使之发展为新的肿瘤标志物或药物治疗靶点成为可能。最近研究发现TPM1可能是miRNA-21的靶基因之一,而miRNA-21是在各种实体肿瘤中研究得最多的miRNA,它在各种实体肿瘤包括肾癌中都是高表达的。然而,对于TPM1在肾细胞癌中的表达水平如何以及TPM1在肾癌中是否也发挥抑癌基因的作用等问题,由于以前没有进行过系统的研究,目前这些情况仍然是不清楚的。但根据现有的事实与理论推测TPM1在肾细胞癌中应该是被下调的,并且在肾细胞癌中发挥着抑癌基因的作用,可能参与了肿瘤细胞的转移和侵袭等恶性生物学行为。为了证实以上推测,本实验运用实时定量PCR、免疫蛋白印记(Westernblotting)和免疫组织化学染色的方法检测了TPM1在肾癌组织和肾癌细胞系OSRC-2及786-O中的表达水平。结合肾细胞癌患者的临床资料,分析了TPM1的表达水平与病理类型、肿瘤分期、肿瘤核分级和术后生存率等临床特征的相关性。构建pcDNA3.1-TPM1重组真核表达质粒,运用lipofectamine2000做媒介瞬时转染OSRC-2和786-O肾癌细胞,研究TPM1在肾癌中的肿瘤生物学功能。使用CCK-8试剂盒检测TPM1转染后的细胞增殖状态;利用划痕实验以及Transwell迁移实验检测TPM1对肾癌细胞迁移能力的影响;使用Transwell基质胶侵袭实验检测TPM1转染前后肾癌细胞侵袭能力的变化;使用流式细胞术PI/AnnexinV双染色和PI单染色法分别检测了TPM1对肾癌细胞凋亡和细胞周期的调控作用。实验结果显示:与正常肾组织相比,TPM1在肾细胞癌中的mRNA和蛋白质表达水平显著且特异的下调。TPM1的表达水平与肾细胞癌患者的肿瘤大小、Fuhrman核分级和疾病特异性生存率相关。在肾癌细胞系中增加TPM1的表达会显著地抑制肿瘤细胞的迁移和侵袭,TPM1还可以促进肾细胞癌细胞的凋亡和非特异性的细胞周期阻滞,这些都提示TPM1是肾细胞癌中潜在的肿瘤抑制基因。