罗汉菜籽活性成分的分离及活性研究

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罗汉菜籽具有良好的保健养生价值,本课题从罗汉菜籽中提取得到神经酸、硫甙和黄酮类化合物,旨在为罗汉菜籽的综合开发利用提供理论基础和实验依据。  本文采用正交实验法优化黄酮提取工艺,提取条件为:乙醇浓度为60%,料液比1∶30,提取时间75min,提取次数2次。用半制备色谱对粗提物中的黄酮进行纯化,用高效液相色谱法(HPLC)测定峰面积百分比,可知峰面积由73.72%提升至95.52%。用NMR和IR对产物进行分析鉴定,知该化合物为三糖苷黄酮,且FRAP值较高,表明其具有较高的抗氧化活性,同时对DPPH自由基、ABTS自由基也具备一定的清除活性。  采用有机溶剂提取法从菜籽中提取得到罗汉菜籽粗油,以石油醚(30-60℃)为萃取溶剂,料液比为1∶8,加热回流75min,提取次数为2次,出油率为18.3%。对粗油进行GC-MS脂肪酸分析,可知神经酸的含量为3.0%。分别探究了金属盐沉淀法、尿素包合法和硅胶柱层析法从罗汉菜籽粗油中提取神经酸的效果,实验结果表明,这些方法更适用于高浓度神经酸粗品的二次分离纯化。  采用有机溶剂提取法提取罗汉菜籽粗硫甙,提取方法为甲醇浓度70%,料液比1∶10,提取时间60min,提取次数2次,在该条件下得到的硫甙粗提物含量为173.1μmol·g-1。通过半制备色谱法从硫甙粗提物中纯化硫甙,最终纯度为72.10%。建立了HPLC分析方法,并对纯化后硫甙的抑菌活性做了初步筛选,发现对铜绿假单胞菌有较好的抑菌活性,最终测得的硫甙粗提物最低抑菌浓度为0.23%,纯化后硫甙的最低抑菌浓度为0.16%。
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