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全氟辛烷磺酸盐(Perfluorooctane sulfonate,PFOS)是目前应用最广泛、使用量最大的一种全氟有机化合物。研究表明,PFOS除了能够引起肝脏、心脏、肺脏、生殖、免疫等多器官多系统毒性外,还能诱发神经毒性。由于PFOS能通过胎盘屏障和血脑屏障,故其神经发育毒性备受关注。本研究采用昆明种母鼠围产期PFOS暴露,建立PFOS的发育毒性模型,HE染色观察PFOS暴露对仔鼠海马和皮层的影响,QPCR检测BDNF/Trk B/CREB信号通路关键基因的表达。结果表明,PFOS暴露损伤海马组织,造成海马组织中空泡的出现,同时降低了BDNF、Trk B、CREB以及突触相关蛋白Syn1和Syp的m RNA水平。除此之外,本实验还采用PFOS处理SH-SY5Y细胞,建立PFOS的体外毒性模型,结果表明,PFOS能抑制SH-SY5Y细胞的增殖,降低BDNF、Trk B、CREB的表达,这与体内研究的结果一致。因此,推测PFOS能干扰神经细胞的BDNF/Trk B/CREB信号通路,这可能是PFOS神经毒性的机制之一。研究一:围产期PFOS暴露对仔鼠海马BDNF/Trk B/CREB信号通路的影响目的:观察围产期PFOS暴露对仔鼠海马BDNF/Trk B/CREB信号通路关键基因表达的影响,探讨PFOS的神经发育毒性机制。方法:24只昆明小鼠随机分为0、0.1、1.0及5.0mg/kg/d PFOS处理组,从GD2-PND21灌胃染毒。PND21天处死仔鼠,收集脑组织,按要求处理样本。HE染色观察脑组织常规病理情况,QPCR检测海马组织BDNF、Trk B、CREB、Syn1及Syp的m RNA含量;结果:PFOS暴露造成了仔鼠海马组织出现空泡,降低了海马中BDNF、Trk B、CREB以及突触相关蛋白Syn1和Spy的m RNA水平;结论:PFOS干扰BDNF/Trk B/CREB信号通路,降低突触相关蛋白可能是其神经发育毒性机制之一。研究二:PFOS暴露对SH-SY5Y细胞BDNF/Trk B/CREB信号通路的影响目的:观察PFOS暴露对SH-SY5Y细胞损伤和BDNF/Trk B/CREB信号通路关键基因表达的影响,探讨PFOS神经毒性机制。方法:不同浓度PFOS(0、10、50、100、150、200μM)处理SH-SY5Y细胞48h,构建PFOS的体外毒性模型,MTT法检测细胞活力,ELISA法检测细胞中BDNF蛋白含量,QPCR法检测BDNF m RNA水平,Westren blot法检测Trk B、CREB、p-CREB的蛋白水平。结果:PFOS暴露引起SH-SY5Y细胞存活率随染毒剂量的增加而降低,与对照组相比,在50-100μM处理组有统计学意义(P<0.05)并抑制了细胞中BDNF、Trk B、CREB表达水平,但促进了CREB磷酸化水平。结论:PFOS暴露能损伤SH-SY5Y细胞,并改变BDNF/Trk B/CREB信号通路关键基因表达。