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目的:1.分离人子宫内膜间充质干细胞（human endometrial mesenchymal stem cell,hEMSCs）,并对hEMSCs、人脂肪间充质干细胞（human adipose-derived mesenchymal stem cells,hADSCs）、人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs）进行间充质干细胞鉴定。2.摸索2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）探针最适合浓度;3.研究H2O 2干预对hEMSCs、hADSCs、hUCMSCs细胞内活性氧（Reactive oxygen species,ROS）水平的影响。方法:1.hEMSCs、hADSCs、hUCMSCs的获取及鉴定:采用酶消法自子宫内膜组织提取hEMSCs。hADSCs、hUCMSCs由合作单位山西大学生物医学研究院提供。观察三种细胞形态,采用流式细胞仪检测三种细胞表面特异性抗原。检测三种细胞成脂、成骨及成软骨细胞的分化能力。2.采用第四代hEMSCs、hADSCs、hUCMSCs,分别加入不同浓度DCFH-DA探针孵育30min,采用流式细胞仪测定细胞绿色荧光百分比,确定最佳浓度。3.采用第四代hEMSCs、hADSCs、hUCMSCs,分别加入不同浓度H2O2作为实验组,采用DCF试剂盒中DCFH-DA探针孵育30min,共干预1h后采用显微镜观察细胞形态,采用流式细胞仪测定细胞绿色荧光发光强度,即ROS表达情况。4.采用graphpad prism 8.0软件进行数据处理。所有数据结果均采用均数±标准差（?±）表示。两组间差异比较采用单因素方差分析,P<0.05表示差异具有统计学意义。结果:1.采用酶消法提取hEMSCs,并对hEMSCs、hADSCs、hUCMSCs进行鉴定。三种细胞均呈现成纤维细胞样形态,流式细胞仪检测表面特异抗原显示:CD73、CD90、CD105阳性;CD34、CD45、CD11b、CD19及HLA-DR阴性。分化诱导实验结果显示:均具有成脂、成骨、成软骨细胞能力。以上结果表明获取的细胞符合间充质干细胞的最低标准。2.设置不同DCFH-DA荧光探针浓度梯度（0、100、150、200、250、300μM）,摸索合适浓度,准确反映细胞ROS水平。实验结果显示:在hEMSCs、hADSCs、hUCMSCs三种细胞实验中,随着浓度的升高,荧光强度百分比逐渐升高,于250μM浓度下到达平台期。3.分别经0、50、100、200、300μM H2O2干预1h后:hEMSCs、hUCMSCs两种细胞ROS含量均随着浓度的升高逐渐增加,300μM H2O2干预后明显增加;hADSCs在不同浓度H2O2干预后,ROS表达无明显变化。表明hADSCs受H2O2影响小,耐受能力较强,可能与抗氧化能力有关。结论:1.成功分离、培养hEMSCs,并对hEMSCs、hADSCs、hUCMSCs进行了鉴定,三种细胞形态正常,符合MSCs表面特异性抗原标准,具有多向分化能力;2.确定250μM DCFH-DA荧光探针浓度作为标准浓度进行后续实验;3.比较hADSCs、hUCMSCs、hEMSCs三种细胞,hADSCs受H2O2影响最小,hEMSCs次之,hUCMSCs反应最为强烈。以300μM H2O2浓度进行干预,可明显提高hUCMSCs、hEMSCs的ROS水平。