化疗是癌症主要治疗手段之一，但易导致多种毒副作用，例如消化道黏膜炎(AM)。中医临床上，化疗所致AM常被辨证为气阴两虚证，方中常含熟地黄(SRR)。本课题组前期工作已经证明SRR能减轻甲氨蝶呤(MTX)化疗所致AM，其机制主要在于抗氧化和抗炎。由于MTX化疗常采用大剂量，而SRR对大剂量MTX(HDMTX)化疗所致消化道黏膜炎(HDMTX-AM)的影响尚未见报道。为了进一步评价SRR在防治HDMTX-AM的有效性和科学性，本论文建立了小鼠HDMTX化疗模型，评价了SRR对HDMTX-AM的影响，重点揭示了SRR对HDMTX化疗的时效关系，同时探讨了SRR的有效部位。
　　一、熟地黄对大剂量甲氨蝶呤化疗小鼠死亡率的影响
　　本研究评价了预防性给予(提前三天)SRR(1.56g/kg，ig)、环丙沙星(CPFX，0.13g/kg，ig)以及SRR与CPFX联合用药对HDMTX(300mg/kg，i.p.)化疗小鼠死亡率的影响，结果发现模型组在化疗后第八天死亡率为27.3％，CPFX组为9.1％，其余各组为0.O％;同时发现HDMTX化疗导致小鼠精神萎靡，部分出现腹泻，体重和摄食量显著下降，SRR和CPFX均具有一定改善作用。
　　二、熟地黄防治大剂量甲氨蝶呤化疗所致消化道黏膜炎的时效关系研究
　　本研究于HDMTX化疗后6、12、24和48h取样，测定MTX血药浓度、氧化损伤和炎症指标，结果发现:化疗后小鼠(1)肠绒毛24h后显著缩短;(2)MTX血药浓度12h后快速下降;(3)丙二醛(MDA)含量显著升高，超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性逐渐降低;(4)肠黏膜核转录因子-κB(NF-κB)于12h达到峰值，随后下降;(5)诱导性一氧化氮合酶(iNOS)和髓过氧化物酶(MPO)水平显著升高，分别于24h和48h达到峰值;(6)血肌酐(SCr)水平于化疗后6h和24h显著升高，而血尿素氮(BUN)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的变化未达到显著水平。
　　与模型组对比，SRR能于化疗后6h显著降低NF-κB和SCr水平，12h降低MDA含量，24h降低SCr、MDA和iNOS水平，48h降低MPO含量;于24h显著提高肠绒毛长度，于48h提高CAT水平，但对MTX血药浓度等影响不显著。以上结果说明SRR对MTX代谢影响不显著，而在化疗早期即可发挥抗氧化和抗炎活性，从而保护肠黏膜。
　　三、熟地黄对大剂量甲氨蝶呤化疗小鼠肠道菌群的影响
　　本研究进一步评价了SRR对HDMTX化疗小鼠肠道菌群的影响，结果发现HDMTX化疗导致小鼠肠道菌群失调，主要表现为:(1)在门级水平上，厚壁菌门相对丰度逐渐降低，拟杆菌门则逐渐升高;变形菌门先减少后增加，放线菌门则相反;(2)在属级水平上，螺杆菌属、梭菌属、Flexispira和埃希氏菌属相对丰度升高，瘤胃球菌属、乳杆菌属、普式菌属和Odoribacter则相对减少。此外，血浆内毒素(LPS)水平于化疗后12h大幅升高。
　　SRR能(1)显著降低化疗小鼠肠道菌群物种数目;(2)对化疗小鼠菌群组成有一定程度的影响，尤其是于化疗后6h和12h显著抑制梭菌属相对丰度的升高;(3)对于LPS的变化影响不显著。
　　四、熟地黄减轻大剂量甲氨蝶呤化疗所致消化道黏膜炎的活性部位探究
　　本研究通过甲醇和乙酸乙酯提取，得到SRR去甲醇部位(F-deMeOH)和SRR去乙酸乙酯部位(F-deEtOAc)，以及SRR乙酸乙酯部位(F-EtOAc)、SRR甲醇部位(F-MeOH)和SRR大分子部位(F-MAC)。首先比较了各部位的褐变程度和指纹图谱变化，接着以SRR水提液为对照，分两次动物实验，评价了各部位对HDMTX-AM的影响，结果发现SRR水提液活性最强，其它样品的抗氧化和抗炎活性均有不同程度下降。
　　本文结果说明，HDMTX化疗后6h即发生显著的氧化损伤和炎症反应，并有逐渐加重的趋势，提示预防性给药对于保护消化道黏膜的重要性。本文预防性给予SRR能避免HDMTX化疗导致的小鼠死亡，其对MTX血药浓度影响不显著，但能显著减轻肠黏膜氧化损伤和炎症反应。此外，本文首次发现SRR还能影响肠道菌群，抑制有害菌，促进有益菌增殖，提示调节肠道菌群也是SRR减轻HDMTX-AM的机制之一。鉴于甲醇和乙酸乙酯处理后，SRR活性降低，说明SRR减轻HDMTX-AM这一功效具有多成分和多靶点特性。