【摘 要】
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研究背景与目的:神经病理性疼痛是临床上的一种复杂的慢性疾病,由神经系统的损伤或疾病引起,可对患者的身体、精神和社会方面的生活质量产生严重影响。近年来,游泳运动训练在神经病理性疼痛的相关研究中发挥着重要作用。lnc RNA H19是最早发现的lnc RNAs之一,是多种癌症的致癌基因,有研究表明lnc RNA H19通过Wnt信号通路,靶向miR-22调控细胞衰老、增殖和退行性变,参与炎症反应。海马
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研究背景与目的:神经病理性疼痛是临床上的一种复杂的慢性疾病,由神经系统的损伤或疾病引起,可对患者的身体、精神和社会方面的生活质量产生严重影响。近年来,游泳运动训练在神经病理性疼痛的相关研究中发挥着重要作用。lnc RNA H19是最早发现的lnc RNAs之一,是多种癌症的致癌基因,有研究表明lnc RNA H19通过Wnt信号通路,靶向miR-22调控细胞衰老、增殖和退行性变,参与炎症反应。海马组织作为边缘系统的一个关键组成部分,除了与学习记忆有关,海马也被认为在疼痛传导通路中占有重要地位,参与各种疼痛信息的处理。但运动训练究竟作用于哪些环节而实现了改善坐骨神经痛的作用,至今尚未完全阐明。基于以上,本研究的目的:1.分析坐骨神经分支选择性损伤（Sciatic Nerve Injury,SNI）诱导的神经病理性疼痛小鼠海马中lnc RNA H19及其靶基因的表达、疼痛行为之间的相关性;2.明确游泳运动训练对SNI小鼠海马中lnc RNA H19及其靶基因的表达、疼痛行为的影响。研究方法:本研究选取六周龄C57BL/6雄性小鼠60只为研究对象,适应性喂养1周后,进行SNI造模,随机将小鼠分为正常（Na?ve）组、假手术（Sham）组、假手术游泳运动训练（Sham+swim）组、SNI组、SNI游泳运动训练（SNI+swim）组。SNI运动训练组、假手术运动训练组进行为期6周的游泳训练干预,其他组常规饲养。在造模前及术后3天、7天、14天、21天、28天、35天、42天进行体重的称量,确保小鼠的健康状况;并进行疼痛行为学的测试,即机械性刺激缩足阈值（Mechanical Withdrawal Threshold,MWT）、40%疼痛强度评分,观察小鼠痛觉过敏和痛觉超敏的变化情况。6周后取材,取各组部分小鼠全脑进行脱水固定、完成冰冻切片,后进行苏木精-伊红（Hematoxylin-eosin,HE）染色和尼氏（Nissl）染色,观察海马组织形态和神经元结构;取剩余各组小鼠脑部海马体,用于定量即时聚合酶链反应（Quantitative real-time polymerase chain reaction,q RTPCR）和蛋白免疫印迹（Western blotting,WB）检测海马组织中lnc RNA H19、miR-22、Wnt/β-catenin的信使RNA（Messenger RNA,m RNA）和蛋白表达水平的变化情况;酶联免疫吸附剂测定（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测海马组织中炎症标志物肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白介素-6（Interleukin-6,IL-6）以及抗炎标志物白介素-10（Interleukin-10,IL-10）表达水平的变化情况。研究结果:进行SNI造模后,各项表现均正常,各组小鼠体重均呈逐渐上升的趋势,在7个不同的测试时间点的体重未显示出显著性统计学差异（p＞0.05）;在SNI造模后第21天、第28天、第35天、第42天运动训练组的MWT和40%疼痛强度评分相较于SNI组明显升高（p＜0.01）;HE染色和Nissl染色显示SNI组海马组织可观察到神经元受损,神经纤维形态不完整,运动训练组相较于SNI组神经纤维的形态也得到了改善,神经元细胞相对完整;q RT-PCR和WB研究显示,SNI组lnc RNA H19表达水平升高（p＜0.01）,miR-22表达水平显著降低（p＜0.01）,Wnt3a、β-catenin显著提高（p＜0.05）;ELISA检测炎症因子水平显著升高、抗炎因子下降（p＜0.01）。6周游泳训练后,运动训练组miR-22表达水平显著升高（p＜0.01）,H19、Wnt3a、β-catenin表达水平显著降低（p＜0.05）,炎症因子水平显著降低、抗炎因子水平显著上升（p＜0.01）。研究结论:为期6周的游泳运动训练可以改善SNI模型小鼠的机械性刺激痛觉过敏和痛觉超敏;并且逆转SNI模型小鼠海马中lnc RNA H19、miR-22、Wnt3a、β-catenin表达的变化,改善海马内的炎症反应。
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