论文部分内容阅读
目的：(1)建立BALB/C和C57BL／6两种不同品系小鼠的镰刀菌和曲霉菌性的角膜炎模型；(2)对比两种品系小鼠真菌性角膜炎的临床表现差异；(3)测定感染眼球及同侧颈部淋巴结的Th1相关细胞因子IFN-γ及Th2相关细胞因子IL-4的变化情况。方法：(1)小鼠角膜真菌感染模型的制作：用2.0mm环转在小鼠角膜中央印痕,自制基质划伤钩于印痕范围内作线形划伤至浅基质层,共5道,板层刀去除损伤区域内残余的角膜上皮,然后将5μl的真菌孢子混悬液(浓度为108CFU／ml)滴入结膜囊,自然干燥。(2)接种后用裂隙灯显微镜观察角膜浸润病灶及眼部炎症反应的变化,每天1次。(3)接种后24h,48h和72h处死小鼠,摘除模型眼及相应侧颈部淋巴结,分别制作成组织匀浆,ELISA法检测Th1相关IFN-γ及Th2相关IL-4的变化。结果：(1)BALB／c小鼠在接种镰刀菌和曲霉菌后仅出现轻、中度角膜浸润混浊和炎症反应,无组织化脓坏死,5-7d内所有角膜浸润消失而痊愈,角膜恢复透明或仅出现少量疤痕；而C57BL／6小鼠在接种真菌后1-2d内即出现浓密的角膜浸润混浊,重度基质水肿和前房积脓,3d后组织发生化脓坏死,角膜穿孔,眼内容突出,最终以严重的角膜疤痕混浊而愈合,部分小鼠出现眼球萎缩。(2)BALB／c小鼠在感染镰刀菌和曲霉菌后眼球IFN-γ均明显升高,高峰值分别为正常的2.9和2.6倍；同时,颈淋巴结IFN-γ也明显升高,但低于感染局部的升高幅度,高峰值分别为正常的2.0和1.5倍。而C57BL／6在感染镰刀菌和曲霉菌后眼球IFN-γ仅轻度升高,且短时间内下降至正常,高峰值仅为正常的1.3和1.1倍,但颈淋巴结IFN-γ则明显升高,在72h分别达到正常的1.6和1.5倍。(3)BALB/c在感染镰刀菌和曲霉菌后眼球IL-4均明显降低,低谷水平仅为正常的0.6和0.5；而颈淋巴结IL-4则逐渐升高,高峰值为正常的1.2和1.5倍。而C57BL／6在感染镰刀菌和曲霉菌后眼球IL-4也明显降低,低谷水平为正常的0.5和0.6,且持续至72h仍维持低水平；但颈淋巴结IL-4也逐渐升高,高峰值为正常的1.9和1.6倍。结论：(1)真菌性角膜炎是以Th1介导为主的免疫炎症反应过程；(2)感染局部Th1反应的强弱是真菌性角膜炎预后的重要因素；(3)BALB/c小鼠感染局部的Th1反应明显强于C57BL／6小鼠；(4)在角膜真菌感染过程中,Th1极化在感染局部和颈淋巴结同步出现,而Th2极化则在感染局部和颈淋巴结出现分离现象。