第一部分多次手术肝癌患者的临床特征及其预后影响因素的分析研究背景和目的：原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的肝切除术后复发是影响其远期疗效的主要原因。目前临床上术前诊断相同,病情相似的患者术后复发和转移率截然不同,多次手术患者在肿瘤复发的过程中,肿瘤复发的病理类型可出现转化,显示出显著不同的肿瘤异质性,其潜在机制尚不清楚。本部分研究拟探讨多次手术肝癌的临床特征,及其影响患者术后生存和复发的危险因素,为其机制研究及临床预后判断提供基础。研究方法：我们回顾性的收集了139例行多次手术肝癌患者的临床资料。所有患者初次手术时原发肝癌病理类型均为肝细胞癌,第二次及以后多次手术后均获取肝癌标本,证实其病理类型是否发生改变。将所有患者按照病理类型是否改变进行分组。其中病理类型改变组为32例,病理类型未改变组为107例。单因素及多因素分析患者第一次手术时临床特征中影响其生存与复发的危险因素,以探索这些临床指标预测多次手术肝癌患者预后的可能性。结果：研究发现病理改变组与未改变组临床特征无显著差异,但病理类型未改变组患者的5年生存率明显高于病理类型改变组患者(75.84%vs.51.32%,P=0.0069)。单因素及多因素分析发现肿瘤病理类型改变(P=0.0069)、HbeAg阳性(P=0.0379)、血清AFP≥400ng/mL(P=0.0114)、NLR≥1.9(P=0.0085)和肿瘤直径≥5.3cm(P=0.0363)是影响患者生存的独立影响因素,而Ishak炎症分级≥7(P=0.0010)、HbeAg阳性(P=0.0183)、肝硬化(P=0.0015)、直接胆红素≥7umol/L(P=0.0025)则是患者复发的显著影响因素。进一步分层分析发现病理类型改变组患者表现出更高的肿瘤异质性,肿瘤直径≥5.3cm(P=0.0018)、血清AFP≥400ng/mL (P=0.0021)和多发性肿瘤(P=0.0010)是其生存的显著影响因素。结论：肿瘤复发过程中出现肿瘤病理类型改变可显著影响患者生存。病理改变组与未改变组二者临床特征相近。第二部分肝脏前体细胞激活对肿瘤病理类型转换及肿瘤干系特征的影响研究背景和目的：我们在第一部分研究发现肿瘤复发过程中出现肿瘤病理类型改变可显著影响患者生存。病理改变组与未改变组二者临床特征相近。但病理类型改变组患者表现出更高的肿瘤异质性,肿瘤直径≥5.3cm、血清AFP≥400ng/mL和多发性肿瘤是其生存的显著影响因素。其潜在机制不明。我们前研究还发现癌旁胆管反应(ductular reaction, DR)可反映肝脏前体细胞(hepatic progenitor, HP)的激活情况,与混合性肝细胞癌的生存与复发相关。本部分研究拟在前期研究基础上探讨癌旁肝脏HP干性激活是否与肿瘤复发过程中病理类型转换相关,及其对肿瘤干性指标表达变化的影响,对其潜在机制进行分析。研究方法：利用免疫组化技术检测患者癌旁胆管反应状况,包括的K7DR, DR的增殖状态(PCNA index of ductular reaction, PIDR)。分析DR对癌旁肝脏前体细胞活化,及对肿瘤内不同干系特征表达(Bmi-1、EpCAM),以及其与肿瘤EMT关键指标Twist-1表达情况。利用统计学分析它们之间的相关性,以及不同干系特征对患者术后生存复发的影响。结果：研究发现病理改变组与未改变组癌旁HP活化与肿瘤内干系特征表达差异显著,病理类型改变组表现出高癌旁EPCAM及高肿瘤内Bmi-1表达。单,多因素分析发现癌旁组织EPCAM阳性(P=0.0473)、癌旁PIDR≥15%(P=0.0283)、肿瘤内Twist-1(P=0.0335)是影响患者生存的独立影响因素,而癌旁PIDR≥15%(P=0.0143)则是患者复发的显著影响因素。进一步分析发现PIDR对癌旁及肿瘤内相关干性指标高表达具有显著相关,包括的癌旁的PCNA-LI Periportal hepatocytes (Correlation0.211, P=0.039),癌旁EpCAM (Correlation0.271, P=0.002),肿瘤内Bmi-1(Correlation0.467, P＜0.001)、肿瘤内Twist-1(Correlation0.196, P=0.026)。结论：复发过程中肿瘤病理类型改变与癌旁HP活化显著相关。癌旁PIDR的激活可影响到肿瘤内干性指标表达Bmi-1、Twist-1表达,提示HP激活可通过癌旁影响到癌,其机制与EMT相关。