论文部分内容阅读
头孢匹林(Cephapirin, CEPP)和头孢洛宁(Cephalonium, CEPL)是第一代半合成的头孢菌素类抗生素,其抗菌谱广,对革兰氏阴性菌和阳性菌具有较强的抗菌活性,在兽医临床上主要用来预防和治疗敏感菌引起的干乳期奶牛乳房炎。本研究采用高效液相色谱串联质谱技术建立了牛奶中头孢洛宁、头孢匹林及其代谢物去乙酰化头孢匹林(Desacetyl Cephapirin,DCEPP)多残留检测方法,并在此基础上通过残留消除试验,对苄星头孢匹林和头孢洛宁干乳期乳房灌注剂的弃奶期进行了初步研究。本研究为牛奶中头孢匹林和头孢洛宁的残留监测提供技术支持,并为临床合理用药提供参考。1.牛奶中头孢匹林和头孢洛宁残留的HPLC-MS/MS法检测：牛奶样品中头孢洛宁、头孢匹林、去乙酰化头孢匹林的残留用乙腈提取,经Oasis HLB固相萃取柱净化,以0.005%甲酸水和乙腈为流动相进行梯度洗脱,采用Waters XBridgeTM C18(4.6x150mm,5μm)色谱柱分离。质谱采用电喷雾正离子源(ESI+)进行离子化,选择反应监测模式(SRM)检测。所检测的药物在添加水平为1、10、100、400μg/kg时,平均回收率在81.17%-100.81%之间,日内变异系数在1.85～11.36%之间,日间变异系数在2.58-11.49%之间。在5-400μg/kg的线性范围内呈良好的线性相关,相关系数为0.9999。本方法测得头孢洛宁、头孢匹林及其代谢物去乙酰化头孢匹林的检测限为0.5μg/kg,定量限为1μg/kg。本研究建立的检测方法其回收率、精密度、灵敏度等参数能满足牛奶中头孢匹林和头孢洛宁残留检测要求。2.苄星头孢匹林和头孢洛宁乳房灌注剂弃奶期研究：选择4头即将进入干乳期的健康荷斯坦奶牛,干乳前挤干每个乳区内乳汁,然后每个乳区分别注入一支苄星头孢匹林或头孢洛宁乳房灌注剂(300mg/支)。给药后奶牛不再挤奶直至产后下一泌乳期开始,产后采集前10次所挤的奶样,每次采集4个乳区的混合奶样用于相关药物的残留检测。初步研究结果显示：干乳期灌注苄星头孢匹林乳房灌注剂的2头奶牛干乳期持续时间分别为48d和58d,产后自前10次泌乳采集的牛奶样品中头孢匹林标示残留物的残留量均低于本方法的检测限0.5μg/kg;干乳期灌注头孢洛宁乳房灌注剂的2头奶牛干乳期持续时间分别为49d和93d,前10次采集的牛奶样品中头孢洛宁标示残留物的残留量亦均低于本方法的检测限0.5μg/kg。这表明奶牛干乳期乳房灌注苄星头孢匹林或头孢洛宁乳房灌注剂后至下一泌乳期开始,其所分泌的乳汁中头孢匹林和头孢洛宁的残留量均低于欧盟规定的最高残留限量(10μg/kg)。根据实测浓度判断法,初步确定干乳期奶牛乳房灌注苄星头孢匹林或头孢洛宁给药后的弃奶期为0日。