论文部分内容阅读
目的本研究旨在探讨金属硫蛋白(metallothioneins, MTs)在低氧诱导甲状腺乳头状癌(Papillary thyroid carcinoma, PTC)侵袭转移中的作用及分子机制。方法 使用5%O2的低氧培养箱孵育甲状腺乳头状癌BCPAP细胞,用Western blotting及RT-PCR检测细胞中MT、HIF-1α、SIP1、 E-cadherin等相关蛋白和mRNA表达；使用Transwell观察细胞侵袭迁移的情况。采用免疫组化SP法检测72例人甲状腺乳头状癌和37例癌旁正常组织中MT、HIF-1α、SIP1和MMP-9的表达水平,分析其表达与临床病理指标的关系及表达的相关性。将BCPAP细胞分为常氧、低氧、低氧+Scrambled-siRNA、低氧+过表达空质粒、低氧+MT2AsiRNA和低氧+MT2A过表达组培养12h后检测MT、HIF-1α、SIP1、E-cadherin和MMP-9蛋白表达及侵袭迁移情况。结果与常氧组相比,低氧处理组BCPAP细胞MT、HIF-1α、SIP1蛋白质表达水平增高,E-cadherin的蛋白质表达水平下降。MT、SIP1的mRNA表达水平增高,E-cadherin的mRNA表达水平明显下降,HIF-1α无显著性差异(P>0.05)。侵袭与迁移实验中,低氧组的穿膜与迁移细胞数均较常氧组显著的增多(P<0.05)。在72例PTC组织中,MT、HIF-1α、SIP1和MMP-9的阳性率分别为52.78%、55.56%、51.39%和54.17%,均显著高于癌旁正常组织(P<0.05)。MT、HIF-1α、SIP1和MMP-9的阳性表达与患者颈部淋巴结转移有显著相关性(P<0.05),MMP-9的阳性表达与肿瘤大小有显著相关性(P<0.05)。MT、HIF-1α及SIP1的表达呈正相关。用MT2A-siRNA转染BCPAP细胞后,低氧诱导的MT、HIF-1α、SIP1和MMP-9表达降低,E-cadherin表达升高。过表达MT2A后,低氧诱导的MT、HIF-1α、SIP1和MMP-9表达升高,E-cadherin表达则降低。结论 低氧诱导甲状腺乳头状癌细胞MT、SIP1表达上调,E-cadherin表达下调,以及侵袭转移性增强。MT、HIF-1α、SIP1和MMP-9在PTC组织中的表达与颈部淋巴结转移密切相关,且存在相关性。MT可能对低氧诱导的PTC细胞侵袭转移具有促进作用。