【摘 要】
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新疆紫草Arnebia euchroma（Royle）Johnst.以根入药,主要分布在我国的新疆地区,现代药理学证明,它对癌症、艾滋病、牛皮癣等许多难治性疾病都有很好的疗效,并发现新疆紫草具有显著的抗氧化、抗炎、抗菌、抗病毒、抗肿瘤活性;目前,对新疆紫草中的萘醌类成分的抗肿瘤作用研究较多,但是对新疆紫草的抗肿瘤活性成分的挖掘还不够充分。因此,本研究以新疆紫草为实验材料,首先对新疆紫草的化学成分进
【基金项目】
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新疆维吾尔自治区自然科学基金项目“面向紫草素生物制备的新疆紫草愈伤组织诱导及药理活性比较”部分研究成果（项目编号:2020D03002）课题主持人:马生军副教授（新疆农业大学）； 2021年自治区研究生创新项目“基于亲和超滤-液质联用技术筛选新疆紫草中的抗肿瘤活性成分”研究成果（项目编号:XJ2021G175）课题主持人:朱恋（新疆农业大学）；
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新疆紫草Arnebia euchroma（Royle）Johnst.以根入药,主要分布在我国的新疆地区,现代药理学证明,它对癌症、艾滋病、牛皮癣等许多难治性疾病都有很好的疗效,并发现新疆紫草具有显著的抗氧化、抗炎、抗菌、抗病毒、抗肿瘤活性;目前,对新疆紫草中的萘醌类成分的抗肿瘤作用研究较多,但是对新疆紫草的抗肿瘤活性成分的挖掘还不够充分。因此,本研究以新疆紫草为实验材料,首先对新疆紫草的化学成分进行全表征,继而通过以雌激素受体为靶点的亲和超滤-液质联用技术对新疆紫草中抗肿瘤活性成分进行快速筛选,并通过分子对接技术对其进行活性评估,进一步明确新疆紫草中抗肿瘤的药效物质基础成分并为阐明这些活性成分的抗肿瘤作用机制奠定基础,这将为新疆紫草的开发产生重要的理论意义和应用价值。主要研究内容及结果如下:（1）新疆紫草的化学成分的全表征。本研究建立了基于UHPLC-Q-Exactive Orbitrap MS在负离子模式下检测新疆紫草化学成分的有效策略。通过全扫描MS、MS~2数据库（mz Vault和mz Cloud）、诊断片段离子、保留时间和参考文献,共鉴定出188个化合物,其中114个为首次从新疆紫草中报道。该研究结果为深入了解新疆紫草有效成分及质量控制奠定了基础。同时,该策略可广泛应用于不同样品的化学表征。（2）基于雌激素受体为靶点的亲和超滤-液质联用技术对新疆紫草活性成分进行筛选。通过对粗提物浓度、受体浓度和孵育时间的优化,确定ERα与ERβ两种雌激素受体的最优亲和-超滤体系,其条件为各取10μL雌激素受体与5mg/m L的新疆紫草粗提物在37℃的条件下孵育60min,结果通过该亲和超滤体系筛选出与雌激素受体α具有亲和活性的化合物14个,与雌激素受体β具有亲和活性的化合物10个。（3）通过分子对接技术进行活性评估。通过Auto Dock 4.2软件对21个雌激素受体特异性配体进行分子对接评价,将选择性配体化合物雌二醇做对接,证明参数设置的合理性。最终来确定具有较好活性的潜在配体,并通过结合力和结合模式了解可能的作用机理。从相互作用的结合能（Kcal/mol）可以看出均表现出一定的结合活性,其中色氨酸、丹酚酸J、1-甲氧基乙酰紫草素、去氧紫草素、Sativan对雌激素受体α的结合能分别为-9.3、-8.5、-7.9、-7.1、-7.1 Kcal/mol,迷迭香酸、槲皮素、丹酚酸C、芦丁、异槲皮素对雌激素受体β的结合能分别为-8.4、-8、-7.1、-6.4、-6.3 Kcal/mol,这进一步证明了通过亲和超滤方法筛选出来的化合物与雌激素受体均有良好的结合活性。
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