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大豆异黄酮广泛存在于豆科植物中，是亚洲人饮食的重要组成部分。大豆异黄酮具有广泛的生物活性，如抗癌，抗氧化，抗血栓形成等。羽扇豆怀特酮(Lup)是一种天然异黄酮类化合物，其结构与大豆异黄酮中的活性成分染料木素十分相似。Lup分布于野生植物如甘草、地果，羽扇豆和非洲紫藤树等。已有的研究显示，Lup具有抗菌和抗氧化活性，但其抗癌活性和机制还未见报道。本实验首先以染料木素为母体，通过合成方法得到Lup，进而对其抗癌活性及作用机制进行深入研究。主要的研究工作如下。 化合物Lup的合成。实验以染料木素为原料，经乙酰化，再通过Mitsunobu反应以及克莱森重排反应，最后水解得到目标化合物Lup。 利用MTT法，评价Lup对人前列腺癌细胞(DU-145，C4-2，CWR22RN1)、人宫颈癌细胞(Hela)、人乳腺癌细胞(MCF-7)、人鼻咽癌细胞(CNE)、人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和非洲绿猴肾细胞(Vero)的细胞增殖抑制率。结果显示Lup对前列腺癌DU-145细胞的增殖抑制活性最好，其IC50为23.7μM，又用不同浓度的Lup处理DU-145细胞24、48和72 h后，细胞增长缓慢，呈时间剂量依赖性。还通过结晶紫染色试验观察了Lup对DU-145细胞聚集成群落的影响，发现Lup能有效抑制DU-145细胞的聚集及生长。 研究Lup抑制DU-145细胞增殖的作用机制:不同浓度的Lup处理DU-145细胞，Hoechst33258染色，显微镜下观察DU-145细胞染色质皱缩，出现凋亡小体；DAPI染色，流式细胞术定量分析Lup对DU-145细胞周期的作用，发现Lup可导致DU-145细胞的细胞周期在S和G2/M期阻滞；Annexin V-FITC/PI荧光双染流式检测显示Lup可诱导DU-145细胞凋亡；Rhodamine123染色膜电位检测Lup可引起DU-145线粒体膜电位(△Ψm)缺失，且经流式分析，线粒体内活性氧的表达增加。Western Blot检测Lup诱导DU-145细胞经线粒体途径凋亡相关蛋白表达的作用，发现Lup能上调Bax,cytochromec,caspase-3,PARP1蛋白的表达，下调Bcl-2,procaspase-9,p-Akt的表达。 研究Lup抗血管生成的作用，MTT检测表明Lup对脐静脉内皮细胞HUVEC的增殖有抑制作用，但毒性比之较DU-145细胞要低，其IC50为50.5。细胞划痕的实验发现Lup对HUVEC细胞的迁移有抑制作用；管腔形成实验显示Lup能破坏HUVEC细胞形成的管腔结构。通过Western Blot检测了Lup对HUVEC和DU-145细胞中的VEGF蛋白表达作用，发现Lup降低了VEGF蛋白表达，说明其靶向VEGF。Blot检测了Lup对HUVEC和DU-145细胞中的VEGF蛋白表达作用，发现Lup降低了VEGF蛋白表达，说明其靶向VEGF。