漏芦对小鼠H22肝癌皮下移植瘤的抑制作用及机制研究

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目的探讨祁州漏芦对小鼠H22皮下移植瘤模型的生长抑制作用及其作用机制。方法建立小鼠H22肝癌皮下移植瘤模型,将实验动物分为模型组、RUWE高、中、低剂量组和5-Fu组,RUWE按400、200、100mg/kg·d剂量ig给药,每日1次,5-Fu组按25 mg/kg·d剂量隔日ip给药,连续给药10d后,处死动物,计算抑瘤率胸腺指数和脾指数。以ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha, TNF-a)和白介素-2(interlekin-2, IL-2),比色法检测血清总抗氧化活力(total antioxidative capacity, T-AOC)和丙二醛(microvessel density, MDA)含量,DNA ladder法检测肿瘤细胞凋亡,以免疫组织化学法检测肿瘤组织内微血管密度(microvessel density, MVD),利用Western blot法检测肿瘤组织血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-la,HIF-1α)、血管内皮细胞生长因子受体2 (vascular endothelial growth factor receptor 2, VEGFR 2)的蛋白表达。结果1、动物实验结果显示,与模型组相比,RUWE能显著减小移植瘤瘤重(P<0.05),提高抑瘤率,其RUWE高、中、低剂量组抑癌率分别为38.05%、34.98%、26.95%,并明显升高脾指数;与5-Fu相比,漏芦能显著增高小鼠实验前后体重(P<0.05),并明显升高脾指数和胸腺指数(P<0.05)。2、血清指标检测结果显示,与模型组相比,RUWE能明显增高血清IL-2和降低TNF-α,增高血清T-AOC和降低MDA水平。3、DNA琼脂糖电泳结果显示,与模型组相比,RUWE组的特征性DNA ladder条带明显。4、免疫组化结果显示,与模型组相比,5-Fu组的MVD明显降低(P<0.05);RUWE中、高剂量组的MVD显著降低(P<0.05)。5、Western结果显示,与模型组相比,RUWE组的VEGF、HIF-lα、VEGFR2的表达均降低。结论RUWE对H22移植瘤具有明显的抑制作用,其作用可能与其增高机体免疫功能和抗氧化能力、促进肿瘤组织凋亡、抑制肿瘤新生血管生成有关。
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