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本文以蜡样芽孢杆菌深圳株Bacillus.cereus Shenzhen754-1[1]在营养丰富的培养基中生长,利用微生物摇床培养发酵法制备磷脂酶C(Phospholipase C,简称PLC),分析并优化了B.cereus Shenzhen754-1发酵制取磷脂酶C的发酵条件。用卵黄平板法和NPPC法对发酵制取的磷脂酶C的活性进行定性、定量检测,并研究了磷脂酶C的部分理化性质。探讨了在不同的脱胶反应条件下,磷脂酶C对菜籽油脱胶效果的影响,在此试验基础上利用正交试验优化了脱胶的反应条件,从而为今后磷脂酶C用于工业上油脂的脱胶提供实验参数。主要实验结果如下:1.B.cereus Shenzhen754-1摇瓶培养优化发酵的条件为:培养基牛肉膏与蛋白胨之比为10:1,培养温度32℃,培养时间24h,转速180r/min,B.cereus Shenzhen754-1制备的磷脂酶C水平达到29U/ml。2.微生物法制取磷脂酶C,利用卵黄琼脂法对制取的粗酶的活性进行定性检测,晕圈的大小反映酶活的高低,晕圈越大酶活越高。B.cereus Shenzhen754-1制取的磷脂酶C对热较敏感,也对pH敏感。在NPPC反应体系中的最适温度为55℃,最适pH为7,在pH6.0~8.0左右活性最稳定。4.分析了在不同的硫酸铵饱和度和沉降时间的条件下,以卵黄平板晕圈的大小为指标,将磷脂酶C的沉降的效果进行比较,其选取的最佳沉降条件为:硫酸铵的饱和度为40%,沉降时间为24h。3.分析了在不同的温度、时间、pH、加酶量的条件下,实验室制取的磷脂酶C用于菜籽油脱胶的试验,并优化了脱胶条件。其结果为:加酶量为0.05%,温度60℃,pH为7,时间220min,脱胶油脂的最低磷残留量为4.3mg/Kg。