杀线虫真菌的筛选鉴定及胶霉毒素的初步分离

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:yilongzhanyuye1
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根结线虫(Root knot nematode,RKN)是危害最严重的植物寄生线虫,其分布广、寄主多,是威胁农业生产的重要病原物。目前,化学杀线剂长期施用,导致作物产生抗药性、抗性品种抗性丧失以及国家双减项目的出台,使越来越多的研究者把目光转向生物防治。本研究以南方根结线虫(Meloidogyne incognita)J2为靶标,对沈阳农业大学北方线虫研究所提供的890株真菌菌株发酵液进行筛选,同时对高效菌株进行鉴定,并进行盆栽和温室田间试验验证;最后,对其代谢产物杀线虫活性物质进行初步探究,主要研究结果如下:1.真菌菌株发酵液杀线虫活性试验:经复筛后共筛出8株对南方根结线虫J2校正死亡率在85%以上的菌株。这8株真菌发酵液不仅对南方根结线虫J2有强毒杀作用,对南方根结线虫卵孵化也具强抑制作用。2.高效菌株的鉴定:以形态学鉴定为基础,充分结合rDNA-ITS分子生物学技术手段,对8株高效生防真菌进行鉴定。结果表明:1株真菌属于曲霉菌,经鉴定菌株Snef354为黑曲霉(Aspergillus niger)。4株真菌属于木霉菌,经鉴定菌株Snef622为深绿木霉(Trichoderma atroviridis),菌株Snef1883为哈茨木霉(T.harzianum),菌株Snef1910为桔绿木霉(T.citrinovirid),菌株Snef2382为拟康宁木霉(T.koningiopsis)。3株真菌属于青霉菌,经鉴定菌株Snef1851为普通青霉(Penicillium commune),菌株Snef2367为产黄青霉(P.chrysogenum),Snef2281为壳青霉(P.crustosum)。3.选取筛选鉴定后的高效菌株桔绿木霉Snef1910和产黄青霉Snef2367进行真菌发酵液促生防病盆栽和温室田间试验:结果表明,桔绿木霉Snef1910和产黄青霉Snef2367发酵液均可显著降低根结指数和土壤中J2数量,并且显著增加株高、根长、根鲜重和根干重,具有明显的促生效果,但由于田间根结线虫发生严重,使番茄植株根鲜重和根干重显著低于对照处理。此外,桔绿木霉Snef1910和产黄青霉Snef2367盆栽试验中对番茄根结线虫的减退率分别高达61.02%和56.67%,温室田间试验30 d的防效分别高达71.43%和64.29%。本研究表明桔绿木霉Snef1910和产黄青霉Snef2367菌株发酵液具有很好的促生和防病效果,为植物线虫病的生物防治提供了新的生防资源。4.桔绿木霉Snef1910真菌代谢产物活性物质初步研究:桔绿木霉Snef1910杀线虫活性物质不在菌株菌丝体中,而存在于菌株的发酵液里。胶霉毒素毒杀线虫活性好,且效果稳定。对菌株的代谢产物进行预处理,经高效液相分析得:桔绿木霉Snef1910代谢产物中没有胶霉毒素化合物,或胶霉毒素化合物含量较少,不足以在色谱图中体现。
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