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在木豆叶药材总黄酮、牡荆苷和总多糖的含量检测方法建立基础上,确定了药材采收期和药材使用部位。根据提取物中三种成分的含量,对水提取工艺过程进行了研究,得到了较佳提取工艺。然后,通过醇沉、柱层析和结晶的方法对水提物进行了分离,得到了含量为50%的总黄酮、70%的总多糖和60%的牡荆苷提取物。最后,60%的牡荆苷提取物经过重结晶、柱层析纯化后得到含量为97%的牡荆苷提取物。一、分析方法的建立:首先建立了木豆叶药材的硅胶薄层鉴别方法,选择的展开剂为苯-乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(3:4:2:0.7:0.3),在254nm紫外灯下检视。然后建立了木豆叶药材总黄酮的含量检测方法,即以牡荆苷为对照品,将样品溶液经三氯化铝显色后,在276.50nm波长下,用紫外分光光度法测定总黄酮含量。建立了牡荆苷的HPLC检测方法,用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,色谱柱为Kromasil KR100-5 C18250×4.6mm:先以甲醇-0.05%冰醋酸(27:73)洗脱50min,再以甲醇-0.05%冰醋酸(90:10)洗脱15min;流速1.000mL/min;柱温32℃;在269nm波长下测定牡荆苷含量。建立了木豆叶药材总多糖的检测方法,即以葡萄糖为对照品,将样品溶液经硫酸-苯酚法显色后,在483.50nm波长下,用紫外分光光度法测定总多糖含量。最后,对多批不同采收期的药材和药材的叶、嫩枝和老枝进行了含量检测,结果发现,木豆叶药材在不同的采收期,总黄酮、牡荆苷和总多糖含量变化很大;药材的叶、嫩枝和老枝的含量也有明显的差别,药用部位应为嫩枝叶。二、提取过程的优化:经过对提取过程的重要影响因素的比较结果,得到的较佳提取工艺为:加入木豆叶药材重量10倍量的水,在100℃下,提取三次,每次1.5h。三、水提物的分离:将木豆叶水提物经过二次醇沉后,得到平均含量为73.54%的总多糖提取物;再将醇沉后的滤液,浓缩后上大孔树脂柱进行洗脱分离,得到平均含量为51.37%的总黄酮提取物;然后,将上述50%以上的总黄酮提取物,经过乙酸乙酯萃取、甲醇重结晶后,得到牡荆苷含量为61.26%的提取物,同时,发现该提取物中还含有一个含量为37.98%的未知化合物,经过鉴定最终确定为荭草苷(Orientin)。最后,将60%以上的牡荆苷提取物过硅胶柱进行分离,并通过重结晶纯化,得到含量为97.40%的高含量牡荆苷提取物。