水稻抗虫相关基因OsSABATH12和OsJMT1的功能分析

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植物SABATH转甲基酶是一类针对某些小分子羧基的氧原子或生物碱中的氮原子进行甲基化,生成相应的甲酯类化合物的酶。目前已经在包括拟南芥、水稻、番茄等多种植物中鉴定出数十种SABATH转甲基酶,包括水杨酸羧基转甲基酶(salicylic acid carboxyl methyltransferase, SAMT)、苯甲酸羧基转甲基酶(benzoic acid carboxyl methyltransferase, BSMT)等。大量研究表明,植物SABATH转甲基酶在植物抗虫防御反应中起着重要作用。但迄今为止,有关水稻中SABATH转甲基酶在抗虫防御反应中的作用尚无研究报道。为此,我们在水稻中克隆了两个SABATH基因,OsSABATH9和OsSABATH12,并就它们在诱导抗虫反应中的可能发挥的作用进行了初步研究。研究表明,OsSABATH12蛋白定位于细胞质中。利用农杆菌介导转化系统获得的过量表达OsSABATH12纯合品系,其OsSABATH12转录水平是对照植株约100倍,导致水稻根系生长显著变短。褐飞虱、白背飞虱雌成虫不喜欢在过量表达品系上取食和产卵,2天后褐飞虱和白背飞虱在突变体上的产卵量分别是野生型水稻上的63.1%和57.6%;但过量表达OsSABATH12不影响褐飞虱的存活率、性比和翅型比;过量表达品系对二化螟的生长影响不明显。原核表达与体外活性检测表明,OsSABATH9编码的蛋白能催化茉莉酸生成茉莉酸甲酯,因此该基因为水稻茉莉酸转甲基酶基因,我们将其命名为OsJMT1亚细胞定位结果表明,OsJMT1编码的蛋白定位于细胞质中。机械损伤、茉莉酸处理、二化螟取食以及褐飞虱取食均能显著诱导OsJMT1的表达,而水杨酸处理却不能诱导其表达。利用农杆菌介导的转化系统,获得并验证了过量表达OsJMT1的纯合品系。通过以上研究,明确了OsSABATH12在褐飞虱与白背飞虱的取食与产卵选择行为中起着重要作用;OsSABATH9编码水稻的一个茉莉酸转甲基酶。同时,获得了上述两个基因过量表达的纯合品系。这为进一步深入揭示两个转甲基酶基因的功能打下了很好的基础。
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