桑葚中花青素的抗氧化活性及与牛血红蛋白间相互作用研究

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本文提出了一种微乳萃取-响应界面的新方法,并通过超声辅助溶剂浸提法,首次应用于桑葚中花青素的纯化。系统研究了经纯化后的桑葚中花青素的抗氧化效果、三种体系的热降解规律等,并将花青素与药物混合后进行包裹,提高了花青素的稳定性。探索了在不同pH条件下,不同浓度的花青素与牛血红蛋白的相互作用,体系粘度和电导率的变化规律。主要的研究内容为:1、桑葚中花青素的提纯优化结合胶体与界面化学和分离工程技术,将超声法辅助溶剂浸提法、响应面法、微乳液萃取法和柱层析法联用,对桑葚中的花青素的提纯工艺进行优化。可得到优化后溶剂组分中乙醇浓度为85.87%;以料液比1:6.3配制;乙醇与醋酸的比例设为3.9:1;以及优化后的外界因素为:在75℃下水浴浸提19分钟;设置的超声功率为125.4 W;超声时间设为29.6分钟;平衡时间设定为60.6分钟。优化后AB-8树脂分离的条件:温度设置为40℃;以60%乙醇浓度洗脱;控制pH值为6。根据优化后的条件得到的花青素粗产品,花青素类成分含有87.62%。在最佳条件下,用该方法对三种不同来源的桑葚样品进行了分析,江苏产地的桑葚品质最好。2、桑葚中花青素抗氧化活性研究研究了提纯优化后的桑葚花青素的抗氧化效果,以维生素C和矢车菊素标准溶液作对比,分别系统探索了桑葚中花青素的总还原能力,-OH自由基去除效果,抑制脂质过氧化效果以及DPPH自由基去除效果。探索了经过响应面法优化和AB-8树脂分离优化后的花青素的热力学稳定性,并与矢车菊素的标准样品作对比。同时将花青素与利巴韦林作为芯材,用壳聚糖对其包裹,以提高其稳定性,微胶囊的半径在80 nm和110 nm之间,利巴韦林和花青素几乎可以包封在微胶囊中,并且具有89.32%和85.08%的高包裹效率。3、花青素与牛血红蛋白间相互作用研究通过紫外、荧光、圆二、粘度、电导率、负染等方法系统的研究了在不同pH条件下花青素与牛血红蛋白的相互作用,及体系粘度和电导率的变化规律。同时探索了利巴韦林和花青素对牛血红蛋白的协同作用。随着花青素浓度不断增加,复合蛋白的肽链不断增多,使得牛血红蛋白中色氨酸和酪氨酸显露出来。花青素与牛血红蛋白相互作用的能量转移的效率为0.2065,临界距离为1.973 nm,键合距离为2.465 nm。
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