黄芪解毒汤干预乳腺癌MCF-7细胞增殖与Hedgehog信号通路影响的实验研究

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Hedgehog信号通路是一个调控胚胎发育的信号转导途径,在胚胎发育及形成后细胞的生长和分化过程中都至关重要。而肿瘤的发生正是由细胞生长增殖失控所导致的。大量的研究结果表明,Hedgehog信号通路的活跃程度与肿瘤发生息息相关关,因此,研究Hedgehog信号通路对于揭示肿瘤的发生和进展,从而针对性地进行疾病防治具有重要的意义。方法及目的:本实验采用光镜观察、MTT比色试验、免疫荧光测定的方法从分子生物学角度探讨黄芪解毒汤体外干预人乳腺癌细胞MCF-7增殖及对SHH、PTCH1、SMO、GLT1mRNA基因和CyclinDl蛋白表达的影响,揭示黄芪解毒汤抑制乳腺癌细胞增殖的作用机制。结果:1.MTT:除5%浓度外含药血清组的OD值与其生理盐水血清组比较差异均有统计性意义(P<0.05),含药血清的组别均具有抑制MCF-7细胞周期,诱导细胞凋亡的作用,抑制率由高到低依次为阿霉素组,黄芪解毒汤组,参一胶囊组;2. RT-PCR检测SHH、PTCH1、SMO、GLI1mRNA基因表达:含药血清干预组的细胞中SHH、PTCH1、SMO、GLT1mRNA基因表达明显降低且有统计学意义(P<0.05),表达由高到低依次为阿霉素组,黄芪解毒汤组,参一胶囊组;3.免疫荧光检测CyclinDl蛋白表达:与生理盐水血清组相比,含药血清干预后的细胞中CyclinDl蛋白表达减少,表达由高到低依次为阿霉素组,黄芪解毒汤组,参一胶囊组。结论:黄芪解毒汤可抑制人乳腺癌细胞MCF-7生长周期,降低人乳腺癌细胞Hedgehog信号通路中多个基因的表达和CyclinD1蛋白表达,为黄芪解毒汤在乳腺癌术后治疗中的作用提供实验依据。
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