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环境温度和病害是影响凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）健康养殖的重要因素。本研究通过生物化学方法研究了温度胁迫对凡纳滨对虾肝胰腺氧代谢及能量代谢的影响;利用基因干扰技术（RNA1）初步研究了干扰NOS对凡纳滨对虾血细胞和肝胰腺免疫功能的影响。利用RACE-PCR技术克隆了NOS下游关键调控因子鸟苷酸环化酶(GCⅢ)基因的全长cDNA序列，并研究了其在对虾不同组织中的表达谱及WSSV病毒粒子刺激后，对虾肝胰腺、神经组织和血细胞中GCⅢ基因在转录水平上的表达变化，同时利用生物化学方法分析了免疫刺激后肝胰腺NOS活力，NO及环鸟苷酸(cGMP)含量的变化;利用大肠杆菌表达系统，在前期获得NOS全长cDNA序列的基础上，获得了其中的NO合成结构域重组蛋白;成功构建了对虾T7噬菌体展示文库。研究结果如下: (1)通过研究低温和高温对肝胰腺氧代谢和能量代谢的影响，发现低温及高温胁迫均会引起肝胰腺内O2-含量及相应抗氧化酶活力增加，但是不同类型的抗氧化酶可能扮演不同角色;高温胁迫会导致NOS活力和NO含量显著增加;而低温及高温胁迫诱导ATP含量显著增加。 (2)以对虾NOS基因NO合成结构域片段为靶序列，体外合成序列特异性dsNOS注射凡纳滨对虾幼虾对NOS基因进行RNA1，检测了干扰NOS表达后人工感染WSSV对凡纳滨对虾血细胞总数(THC)，血细胞及肝胰腺中NOS活力及NO含量变化，以及肝胰腺中cGMP含量的影响。结果表明，注射dsNOS后NOS转录表达被抑制，NOS活力和NO合成显著下降，THC降低，但是cGMP含量上调。 (3)凡纳滨对虾鸟苷酸环化酶LvGCⅢ基因全长1641bp，包括一个654bp的5’端非翻译区，132bp的3’端非编码区和855bp的开放阅读框，可编码284个氨基酸，具有一个CYCc结构域。LvGCⅢ基因在肠、神经、脑、心脏、皮肤和肝胰腺中表达量相对较高，而在胃、肌肉、血细胞和鳃中表达量相对较低。WSSV免疫刺激后，LvGCⅢ在肝胰腺中表达量显著上调(P＜0.05)，在神经和血细胞中表达量变化不显著。WSSV刺激后，肝胰腺NOS活力先上调后下降，NO含量变化趋势与之相似;感染WSSV早期cGMP含量显著上调(P＜0.05)，感染末期却显著下调(P＜005)。 (4)获得了高纯度可溶性pET-32a(+)-NOS重组蛋白。经Western blot鉴定，重组蛋白为对虾NOS基因NO合成结构域蛋白。 (5)选取未刺激健康对虾肝胰腺、肌肉、神经、肠、胃、心脏、鳃、眼柄、血细胞和皮肤组织提取总RNA混合后用于分离mRNA，成功构建了对虾T7噬菌体展示文库，文库插入率为87％，大于250bp片段比例为70％。扩增后文库滴度达到28×1016pfu/mL。