蛋白质贯穿着所有的生命活动过程，是生命科学研究的重要内容之一。有些蛋白质在人体中的含量极低，传统的蛋白定量方法，如凝胶电泳、凯氏定氮法、比浊法、放射免疫法等，灵敏度低，不能对其进行准确测定。因此，蛋白质的高灵敏检测方法对疾病的预防和诊断具有重要的意义。电化学生物传感器因其反应迅速、灵敏度高、价格低廉、易于携带等优点，已广泛应用于临床检测和环境监测等领域，为人类卫生事业的发展提供了强有力的支持。核酸适体作为一种新型的识别元件，不仅具有可以与抗体相媲美的高特异性、高亲和性，更具有成本低，稳定性好，易修饰等优势,有利于生物分析应用。以适体作为识别元件的电化学生物传感器目前已受到越来越广泛的关注与研究。本论文研究了凝血酶与相应适体的相互作用，并在纳米金粒子反应平台表面发展了一种灵敏度高且特异性好的电化学传感器用于凝血酶的检测。本论文主要包括以下两部分：1.发夹型核酸适体电化学传感器的构建通过增加特殊的碱基序列将适体设计成发夹结构，构建了一种用于凝血酶检测的新型发夹适体电化学传感器。在均相溶液中，通过凝血酶和发卡适体的特异性结合，可以调控发卡适体的构象，即打开发夹结构茎部，暴露出一段碱基序列，并与电极表面的捕捉探针互补结合。通过检测探针可确定电极表面剩余捕捉探针的多少，根据电化学信号的大小来定量测定凝血酶的含量。应用电化学阻抗（EIS）、方波伏安法（SWV）监控传感器的组装过程，凝血酶在3×10-2~3nM范围内具有良好的线性响应，检测限达0.01nM,非特异性识别蛋白不干扰测定，本部分成功构建了可在均相溶液中识别反应的发卡结构适体电化学生物传感器。2.基于金纳米粒子信号放大的发夹结构适体生物传感器检测凝血酶将第一部分所设计的发夹适体结合纳米金建立一种灵敏度高，选择性好的适体电化学传感器用于凝血酶的检测。链霉亲和素-碱性磷酸酶催化底物产生电化学信号。发夹适体与靶体整个识别过程是在均相中进行的，从而保证了发夹适体的亲和性和稳定性。纳米金粒子可有效增加金电极的有效表面积及电子传递速率。在最优的实验条件下，传感器在缓冲液中对凝血酶的最低检测限达0.52pM，在血清标本中的检测限达6.9pM。