湖北贝母(Fritillaria hu pehensis Hsiao et K CHsia)为百合科植物的干燥鳞茎,是中国药典2005年版的收载品种,现已发展成为仅次于浙贝母的第二大主流品种。本品性味微苦,凉。入肺、心二经,具有清热润肺、化痰止咳及解毒散结之功效,用于痰热咳嗽,咯痰带血,瘰疬疮疡肿毒。湖北贝母鳞茎的主要活性成分为生物碱如浙贝甲素、浙贝乙素、湖贝甲素、湖贝甲素苷、湖贝乙素、湖贝嗪、湖贝新、湖贝啶、湖贝苷、鄂贝新等,且鳞茎生物碱的种类和含量均高于川贝和浙贝,具有很高的临床应用价值和很好的研究开发前景。目前对于湖北贝母净制工艺的研究暂无报道,也无大生产可用的量化标准。本课题初步制订了湖北贝母的最佳净制工艺和质量标准,为炮制机械化大生产提供了可控的质量标准,也为国家实行饮片分级管理提供了参考。本课题对湖北贝母的水洗工艺和干燥工艺进行筛选,初步确立了最佳炮制工艺,并进行了验证试验和中试试验。通过对湖北贝母性状、鉴别、检查、浸出物、贝母素甲含量等指标的考察,初步制订了湖北贝母的质量标准。本课题采用与上市产品相同包装的三批湖北贝母,分别考察其性状、鉴别、检查、浸出物、贝母素甲含量,进行了长期试验和加速试验,结果所有考察指标均正常。利用HPLC法,对湖北贝母饮片的十个批次进行了指纹图谱研究,为湖北贝母药材的GAP种植和炮制后湖北贝母饮片的质量控制提供了科学依据,也为进一步研究贝母活性物质基础提供了参考,为国家制定饮片规格分级管理提供了依据。一、湖北贝母最佳炮制工艺的确定参考预试验,并综合考虑湖北贝母的特性,运用正交设计实验方法对湖北贝母的水洗和干燥工艺进行了筛选,初步制订了最佳炮制工艺,为湖北贝母的炮制大生产提供了量化依据。在水洗工艺中,对加水量、水洗时间和水洗次数三方面因素进行筛选,通过对贝母素甲的含量、水溶性浸出物、醇溶性浸出物和总灰分四个考察指标的测定,采用L9(34)正交试验方法和加权综合评分,优选出最佳水洗工艺条件为加一倍水,洗两次,每次两分钟。并对最佳水洗工艺进行验证试验。在干燥工艺中,综合考虑温度、时间、翻动次数三个因素,通过对含水量、水溶性浸出物、醇溶性浸出物和贝母素甲含量四个考察指标的测定,采用L9(34)正交试验方法和加权综合评分,优选出最佳干燥工艺条件为干燥温度为65℃,干燥时间为4小时,翻动两次。并对最佳干燥工艺进行验证试验。选用十批产自GAP产地的湖北贝母药材,在武汉刘天保饮片厂进行了中试研究,平均收得率为81.55%。二、湖北贝母饮片质量标准的制订根据湖北贝母主要成分的化学性质,从性状、鉴别、检查、浸出物以及含量测定等方面初步建立了饮片的质量标准。采用显微、薄层和理化方法对湖北贝母饮片进行了鉴别。薄层鉴别中,硅胶G薄层板,以苯-醋酸乙酯-二乙胺(30：20：3.8)为展开剂,喷以稀碘化铋钾试液显色。该法简便、迅速、专属性好。利用湖北贝母的主要成分生物碱的理化性质,进行了沉淀反应和荧光吸收。该方法操作简单,专属性好。检查了杂质、水分、灰分和微生物四项指标,并制订了各项指标的范围。对水溶性浸出物和醇溶性浸出物分别进行含量测定,并制订了各项指标的范围。采用HPLC-ELSD法对湖北贝母中的贝母素甲含量进行测定,测定结果各批样品中贝母素甲的最低含量为0.090%,考虑到储藏、产地等综合因素,初步制订湖北贝母中贝母素甲的含量不得少于0.050%三、湖北贝母稳定性的试验在长期稳定性试验中,取与市售产品相同包装的三批湖北贝母,按照其贮藏要求,置通风干燥处,分别在0、3、6、9、12、18个月,考察其性状、鉴别、检查、浸出物、贝母素甲含量及包装,结果所有考察指标均正常。在加速稳定性试验中,取与市售产品相同包装的三批湖北贝母,使其温度为40±2℃,相对湿度为75±5%,分别在0、1、2、3、6个月,考察其性状、鉴别、检查、浸出物、贝母素甲含量及包装,结果所有考察指标均正常。四、湖北贝母HPLC指纹图谱定性鉴别建立了湖北贝母饮片的10批样品指纹图谱,标定了10个共有峰,共有峰总面积占总峰面积的90%以上,各批样品指纹峰的峰形较为一致,各共有峰的相对保留时间RSD和峰面积RSD均小于3%,有较好的重现性。通过对湖北贝母生品和饮片的指纹图谱比较,结果显示：炮制前后共有峰相对保留时间无明显变化,但有些共有峰峰面积比值发生了显著变化,说明炮制后主要成分的含量发生了变化。这为进一步对湖北贝母饮片品质优劣的评定和综合评价奠定基础。