目的：探讨人骨髓间充质干细胞(BMSCs)与自体脱钙松质骨基质(DBM)体外复合,构建组织工程软骨的可行性。方法：1、术中获取股骨头,利用不离心的全骨髓贴壁培养法分离人BMSCs,进行体外培养扩增,通过形态学观察选用第3代细胞,MTT法绘制生长曲线,流式细胞仪鉴定人BMSCs。2、第3代人BMSCs,利用高密度微团诱导培养法进行成软骨诱导。21天后固定标本,进行病理组织学染色,观察糖胺多糖和Ⅱ型胶原的表达来检测人BMSCs的成软骨诱导能力。3、术中获取股骨头,利用改良Urist法制成DBM,通过电镜观察和降解率等性能测定。将DBM与人BMSCs体外复合后分为2组(n=36)。实验组进行成软骨诱导培养,对照组不进行成软骨诱导。4、细胞支架复合物于第1、2、3个月取材行大体、电镜形态学观察、H-E、阿利新蓝及Ⅱ型胶原免疫组化染色,利用IPP软件行Ⅱ型胶原免疫组化IOD值测定并行统计学分析。结果：1、不离心全骨髓贴壁培养获取的细胞形态呈长梭状,细胞生长曲线示最佳接种浓度为5×104/ml。流式细胞仪测得细胞表面高表达CD29、CD44和CD105,低表达CD34和CD45。标本诱导后进行阿利新蓝染色示胞质中蓝染,提示有糖胺多糖表达；Ⅱ型胶原免疫细胞化示细胞外基质中可见棕褐色,提示Ⅱ型胶原表达。2、DBM呈立体网状结构,孔径约340μ m,约12周能基本降解完全。电镜观察显示随着DBM降解,细胞处于生长分化的动态过程。3、两组细胞支架复合物病理组织学染色对比,实验组阿利新蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组化呈阳性表达。Ⅱ型胶原免疫组化IOD值统计学分析表明,第3个月,实验组与对照组比较有统计学意义,Ⅱ型胶原的表达有差异；实验组内第3个月与前两个月比较均有统计学意义,表明Ⅱ型胶原的表达存在差异。结论：1、第3代人BMSCs适合作为软骨组织工程的种子细胞。2、人BMSCs与自体DBM体外复合后进行成软骨诱导,具备一定的组织工程软骨特性。全文图45幅,表2个,参考文献73篇。