目的 PCNA是DNA多聚酶δ的辅助蛋白,直接参与DNA合成,能客观地反映原发性肿瘤细胞的恶性增殖分数和生长速度;MMP-9在胶质瘤生物学行为中的作用主要是体现在肿瘤的局部侵袭作用,它们的表达异常与肿瘤的生物学行为密切相关。本实验在检验人脑原发和复发性胶质瘤中PCNA、MMP-9的表达情况的同时,对于PCNA、MMP-9的表达强度与胶质瘤病理分级、PCNA与MMP-9二者之间的关系及其与肿瘤复发之间的关系进行了阐述。 方法 1、标本来源 收集中国医科大学附属第一、二医院在1998年-2003年间手术切除同一患者原发、复发胶质瘤19例。其中男性15人,女性4人。每位患者均取两次术后石蜡病理组织块,计38块。按照2000年WHO制定的神经系统肿瘤分类标准确定病理诊断和分级。另外取2004年1月-3月间因重度颅脑损伤而行内减压手术切除的脑组织,制成石蜡标本作为非肿瘤对照组,计10例。 2、免疫组化染色方法 全部48例标本经甲醛固定和石蜡包埋后,进行免疫组织化学染色,检测PCNA、MMP-9的表达。具体步骤如下:首先将石蜡标本制成5微米厚切片,常规二甲苯脱蜡、酒精脱水后,切片浸入3%H₂O₂溶液中,室温下孵育10分钟,以阻断内源性过氧化物酶的活性。切片浸入0.01M枸橼酸溶液（PH=6.0）中,用500W微波炉加热进行抗原修复10分钟。切片滴加正常