花粉症患者外周血细胞因子和淋巴细胞亚群变化研究

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目的:通过检测花粉症患者花粉期和非花粉期血清和过敏原刺激外周血单个核细胞(PBMC)培养上清液中细胞因子,以及外周血中淋巴细胞亚群绝对计数的变化,探讨细胞因子和外周血淋巴细胞亚群在花粉症患者花粉期和非花粉期的作用。方法:本研究分两个部分,1:利用液态悬浮芯片(Luminex)技术检测26例花粉期花粉症患者、20例非花粉期花粉症患者和20例健康体检者血清中IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-17A、IL-28A、GM-CSF、TNF-α、TNF-β、IFN-γ、CCL20、 IL-12p70、IL-9、IL-10、IL-13、IL-15、IL-17E、IL-17F、IL-21、IL-22、IL-23、IL-27、IL-31和IL-33共25种细胞因子含量,进行差异性比较分析;2:通过自身对照的方式,利用Luminex技术检测20例蒿花粉症患者在花粉期和非花粉期PBMC与蒿过敏原提取液共刺激培养后的上清液中细胞因子的含量,通过全自动血液分析仪和流式细胞仪分别检测外周血细胞数量和淋巴细胞亚群。结果:1.花粉期和非花粉期花粉症患者血清细胞因子比较显示,花粉期TNF-α表达高于非花粉期(P<0.05),其余细胞因子表达水平无显著差异(P>0.05)。花粉症患者和正常组比较显示,花粉期和非花粉期血清中细胞因子IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-17A和TNF-β表达水平均高于正常组(P<0.05)。另外,花粉期IL-5、GM-CSF、 TNF-α、IFN-γ和IL-28A的表达高于正常组(P<0.05)。其余14种细胞因子在三组间比较均无统计学差异(P>0.05)。2.花粉症患者花粉期和非花粉期PBMC在刺激后细胞因子分析显示,花粉期IL-1β、IL-17A、IL-23和IL-33浓度显著高于非花粉期(P<0.05),且花粉期IL-23和IL-17A成正相关关系(r=0.573,P=0.01),而非花粉期CCL20浓度高于花粉期(P<0.05)。其余细胞因子表达水平无显著差异(P>0.05)。3.花粉症患者花粉期与非花粉期的外周血细胞计数和淋巴细胞亚群比较分析显示,花粉期外周血嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、CD8+CD28+和CD8+CD38+T细胞显著升高(P<0.05),自然杀伤NK细胞显著降低(P<0.05)。B淋巴细胞、T淋巴细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+CD28+T细胞、纯真和记忆T细胞在两期间无明显变化(P>0.05)。结论:1.花粉症患者中,IFN-Y具有Th2细胞因子作用。花粉症患者在花粉期和非花粉期均处于慢性炎症状态。2.花粉症患者花粉期PBMC经致敏花粉刺激后IL-1β、IL-33、IL-17和IL-23升高,花粉期外周血嗜酸性和嗜碱性粒细胞明显升高,花粉症患者花粉期NK细胞降低,花粉期CD8+CD28+和CD8+CD38+T细胞处于激活状态,在过敏性炎性反应中发挥重要作用。
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