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世界范围内,宫颈癌的发病率处于较高水平,在所有女性恶性肿瘤中居第二位。而我国每年新增11万以上的宫颈癌患者,且每年约有2～3万女性死于宫颈癌。尽管通过手术联合放疗、化疗等多种先进治疗手段应用于宫颈癌的治疗,可是仍然没有一种有效的方法能彻底治愈宫颈癌。这主要是因为宫颈癌发病机制比较复杂,而我们并没有对其完全的了解的缘故。近期的研究表明多种miRNAs在宫颈癌组织中表达异常,并通过调控下游靶基因影响癌症的发生和发展。例如:miR-497在宫颈癌细胞和癌组织异常的低表达,并导致高恶性程度宫颈癌的形成。MiR-196a在鳞状宫颈癌中高表达,其具有负调控netrin4的作用,而netrin4蛋白的低表达伴随着强侵袭的肿瘤发生,患者的预后更差。这些研究证据揭示了miRNAs可能通过各种不同的方式和途径对宫颈癌的癌变过程起促进或者抑制作用。本实验通过QRT-PCR对宫颈癌组织标本及癌旁组织和4种宫颈癌细胞系(Hela、Siha、CaSki、C-33A)及一种子宫内膜癌细胞(HEC-1A)中的miR-93-5p基因表达检测分析。结果表明,相比于正常组织,miR-93-5p在宫颈癌组织中是高表达的。而在细胞中,miR-93-5p在CaSki中相对高表达而在其余四种细胞中表达相对较低。根据细胞中miR-93-5p的表达情况,我们在HEC-1A和CaSki这两种细胞进行miR-93-5p的过表达和抑制处理,从“正”和“反”两方面研究miR-93-5p对这两种细胞的增殖、迁移和侵蚀的影响。实验结果表明过表达miR-93-5p能够增强HEC-1A细胞的增殖、迁移和侵蚀能力。与之相反,miR-93-ASO抑制了CaSki细胞的增殖、迁移和侵蚀能力。通过生物信息学分析发现,TNFAIP1基因可能是mir-93-5p的下游靶基因。TNFAIP1是受TNF-α或IL-6诱导的蛋白,它在DNA合成、细胞凋亡等方面扮演了重要的角色。Western blotting对五种细胞系中的内源TNFAIP1表达检测并分析发现,HEC-1A中的内源TNFAIP1的表达量最高,而CaSki中的TNFAIP1的表达量最低。荧光素酶活性实验证明在CaSki和HEC-1A中miR-93-5p能够抑制TNFAIP1的转录活性。同时,Western blotting和QRT-PCR检测在HEC-1A细胞和CaSki细胞中分别过转miR-93-5p和miR-93-ASO后TNFAIP1的mRNA和蛋白表达水平的变化。结果证明mir-93-5p可以在转录水平和蛋白水平靶向抑制TNFAIP1的表达。另一方面,我们通过QRT-PCR对28对宫颈癌组织标本及癌旁组织中的TNFAIP1表达水平进行检测分析后发现,与正常癌旁组织相比,TNFAIP1基因在宫颈癌组织中低表达。通过转染si-TNFAIP1将细胞中的TNFAIP1表达下调后的HEC-1A细胞在增殖、迁移和侵蚀方面的能力都比对照组更强。相反,与对照组相比,过表达TNFAIP1后的CaSki细胞增殖、迁移和侵蚀的能力减弱。这与miR-93-5p或miR-93-ASO引起的宫颈癌细胞生物学行为变化是一致的。我们的研究表明miR-93-5p通过调控TNFAIP1来调控宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵蚀。这证明了 miR-93-5p在宫颈癌发生过程中起着重要的作用,同时也为小分子RNA信号途径导致宫颈癌发生这一重要分子机制提供新的证明,并为进一步揭示宫颈癌发生的复杂调控分子机制和为将来对宫颈癌的基因诊断和分子干预手段的治疗提供理论依据。