【摘 要】
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目的:探索参苓白术散通过Linc01615/mi R-491-5p对结直肠癌细胞凋亡、细胞周期和侵袭的影响,为该信号通路提供有效的抑制药物。方法:1.制备含有参苓白术散的大鼠含药血清。2.选择结直肠癌细胞株Lo Vo进行试验,通过细胞转染构建分组:空白对照组、参苓白术散组、参苓白术散组+si RNA Linc01615、参苓白术散组+oe Linc01615、参苓白术散组+mi R-491-5p
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目的:探索参苓白术散通过Linc01615/mi R-491-5p对结直肠癌细胞凋亡、细胞周期和侵袭的影响,为该信号通路提供有效的抑制药物。方法:1.制备含有参苓白术散的大鼠含药血清。2.选择结直肠癌细胞株Lo Vo进行试验,通过细胞转染构建分组:空白对照组、参苓白术散组、参苓白术散组+si RNA Linc01615、参苓白术散组+oe Linc01615、参苓白术散组+mi R-491-5p mimics、参苓白术散组+mi R-491-5p抑制剂组、参苓白术散组+mi R-491-5p mimics+oe Linc01615,加入相应的血清进行干预。3.经相应的血清处理后,Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期分布情况,transwell实验检测细胞侵袭情况。结果:1.在显微镜下观察各组Lo Vo细胞形态,可以看出参苓白术散处理细胞后,细胞数目减少,抑制了细胞增殖;在分别加入si RNA Linc01615和mi R-491-5p mimics后抑制效果更为显著说明参苓白术散可以促进Lo Vo细胞的死亡,抑制li nc01615和过表达mi R-491-5p会加重细胞死亡进程。2.通过流式细胞术检测Lo V o细胞的凋亡率,结果显示空白对照组、参苓白术散组、参苓白术散组+si RNA Linc01615、参苓白术散组+mi R-491-5p mimics的凋亡率分别为1.2%、10.74%、11.54%、11.67%,参苓白术散组中Lo Vo细胞的凋亡率增加,且在分别加入si RN A Linc01615和mi R-491-5p mimics后凋亡率增加更显著,说明参苓白术散可以促进Lo Vo细胞的凋亡,且抑制Linc01615和过表达mi R-491-5p细胞凋亡更佳严重。而在参苓白术散组+mi R-491-5p mimics+oe Linc01615组的凋亡率为1.73%,表明过表达的Linc01615可部分逆转mi R-491-5p mimics对Lo Vo细胞的促凋亡作用。3.流式细胞术检测Lo Vo细胞的周期改变,可得出结论:参苓白术散处理细胞后,抑制了细胞周期的G0/G1期;分别加入si RNA Linc01615和mi R-491-5p mimics后抑制效果更佳显著,说明参苓白术散可以抑制细胞周期,促进Lo V o细胞的死亡,抑制Linc01615和过表达mi R-491-5p对细胞周期的阻断更加严重。4.侵袭实验结果显示参苓白术散处理细胞后,抑制了细胞侵袭;分别加入si RNA Linc01615和mi R-491-5p mimics后细胞数明显减少,抑制效果更佳显著,差异具有统计学意义（p＜0.05）,说明参苓白术散可以抑制Lo Vo细胞的侵袭能力,抑制Linc01615和过表达mi R-491-5p会更加抑制细胞侵袭,而过表达的Linc01615可阻滞过表达mi R-491-5p对Lo Vo细胞侵袭功能的抑制。结论:1.参苓白术散能够抑制体外培养的Lo Vo细胞的增殖、侵袭,促进凋亡并将细胞周期阻滞于G0/G1期,且在下调Linc01615的表达和上调mi R-491-5p的表达后效果更为显著。2.参苓白术散可能通过Linc01615/mi R-491-5p调控结直肠癌细胞生物学功能。
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