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背景:前列腺癌（prostate cancer,PCa）已成为男性泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤。在世界范围内,其发病率和肿瘤特异性死亡率在男性全部恶性肿瘤中分别高居第二位、第五位。现存PCa患者已逾千万例,且每年新增确诊的PCa患者近1,300,000例。在美国,PCa已成为发病率最高的男性恶性疾病,而死亡率在男性恶性肿瘤中位居第二位。虽然目前我国男性PCa发病率和死亡率低于欧美国家,但近年来已呈现出持续快速上升趋势,严重危害我国男性居民生命健康并给公共卫生工作带来极大挑战。环状RNA（circular RNA,circRNA）是由于反向剪接而产生的一种特殊类型的内源性长链非编码RNA,与糖尿病、神经系统疾病、心血管疾病、慢性炎症性疾病和恶性肿瘤等多种疾病密切相关。同时,circ RNA的一系列特征也使其具有成为肿瘤疾病生物标志物的潜力:（1）在各种组织中特异性表达,也可富集于外泌体中并释放到血浆、唾液和尿液等体液中;（2）环状结构使其具备高稳定性;（3）可通过测序或q RT-PCR精准测量,而蛋白质生物标记物需抗原-抗体相互作用才能量化。circ RNA可通过竞争性结合mi RNA、调控RNA结合蛋白、调控选择性剪接或转录、编码多肽等机制参与恶性肿瘤的发生发展、迁移、侵袭、化疗耐药、免疫逃逸、肿瘤代谢等病理过程。PCa组织中同样存在大量反向剪接形成的circRNA,功能筛选分析提示PCa组织中近11.3%的高表达circ RNA可调控PCa增殖、迁移、侵袭能力,后续研究表明circ RNA与PCa患者的临床病理特征同样相关,并可成为新的PCa诊断标志物或治疗靶点。尽管人们已对部分circ RNA进行了研究,但大部分差异表达的circ RNA对PCa病理过程的影响尚未被探究。在本研究中,我们将利用生物信息学分析研究PCa组织中circ RNA的表达谱,验证circ RNA在PCa组织和细胞中的表达水平,评估其表达水平与PCa患者临床病理特征之间的相关性,并深入研究circ RNA对PCa细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其具体作用机制。方法:1.生物信息学分析GEO数据库中PCa组织的circRNA表达谱,q RT-PCR检测circ＿0086722在PCa组织和细胞系内的表达,并利用放线菌素D实验、RNase R酶消化实验检测PCa细胞内circ＿0086722的稳定性;核质分离和FISH实验分析circ＿0086722在PCa细胞内的亚细胞分布;分析circ＿0086722表达与年龄、体质指数、术前总PSA、病理N分期、标本Gleason评分、病理T分期等临床病理特征之间的相关性,COX回归分析PCa术后生化复发事件的独立危险因素。2.构建稳定干扰及过表达circ＿0086722的PCa细胞株,CCK8实验、平板克隆实验检测circ＿0086722对PCa细胞增殖能力的影响;Transwell实验检测circ＿0086722对PCa细胞迁移、侵袭能力的影响。3.circBank数据库和Starbase数据库预测circ＿0086722可能靶向的mi RNA;q RT-PCR检测circ＿0086722干扰及过表达后PCa细胞内mi RNA的表达变化;RIP实验、mi RNA pull down实验、双荧光素酶报告基因实验分析PCa细胞内mi RNA与circ＿0086722的结合关系。4.分别用miRNA inhibitor、miRNA mimics转染稳定干扰及过表达circ＿0086722的PCa细胞系;利用CCK8、平板克隆及transwell小室实验等设计功能学回复实验。5.Pearson相关性分析评估circ＿0086722与miRNA靶基因之间的相关性;qRT-PCR和western blotting检测干扰及过表达circ＿0086722后PCa细胞内mi RNA靶基因的表达变化;双荧光素酶报告基因实验验证mi RNA与靶基因之间的结合关系;利用CCK8、平板克隆及transwell小室实验等设计回复实验验证circ＿0086722对PCa进展的影响依赖于mi RNA靶基因。6.构建裸鼠体内荷瘤模型以评估circ＿0086722对PCa细胞体内生长能力的影响。结果:1.qRT-PCR检测发现circ＿0086722在PCa组织及细胞中明显高表达;放线菌素D实验、RNase R酶消化实验证实PCa细胞内circ＿0086722结构稳定性较高;核质分离实验和FISH实验显示circ＿0086722主要分布于PCa细胞胞质内;进一步分析其表达水平与临床病理特征之间的相关性,结果发现:PCa组织内circ＿0086722的表达和PCa的病理T分期、标本Gleason评分等指标明显相关,且circ＿0086722高表达组患者的无生化复发生存率明显不如circ＿0086722低表达组。COX回归分析证实病理T分析、标本Gleason评分和circ＿0086722高表达等是PCa术后生化复发事件的独立危险因素。2.CCK8实验、平板克隆实验证明circ＿0086722可明显增强PCa细胞增殖能力;Transwell小室实验证实circ＿0086722可提高PCa细胞迁移、侵袭能力。3.生物信息学分析及qRT-PCR验证提示miR-339-5p可能是circ＿0086722潜在靶向位点,RIP、miRNA pull down及双荧光素酶报告基因实验证实circ＿0086722与mi R-339-5p存在直接作用关系。4.CCK8、平板克隆、Transwell小室实验等回复实验证实上调miR-339-5p可逆转circ＿0086722对PCa发生发展的影响。5.Pearson相关性分析提示circ＿0086722与STAT5A表达正相关,qRT-PCR、western blotting研究证实circ＿0086722可正向调控PCa细胞内STAT5A的表达。而双荧光素酶报告基因实验证实STAT5A为mi R-339-5p的靶基因,功能回复实验证实si-STAT5A可逆转circ＿0086722对PCa进展的影响。6.裸鼠移植瘤模型验证circ＿0086722对PCa细胞体内生长能力的影响,结果证实circ＿0086722能促进PCa的进展。结论:1.circ＿0086722在PCa组织和细胞系中高表达,且与病理T分期、标本Gleason评分等指标明显相关,可作为潜在的PCa诊断标记物或治疗靶点;2.circ＿0086722主要分布于PCa细胞胞质,并可通过miR-339-5p/STAT5A轴促进PCa细胞增殖、迁移、侵袭能力。