胸导管引流及丹参多酚酸对大鼠重症急性胰腺炎并肝损伤影响的实验研究

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目的:肝脏是重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP)时胰腺外脏器损伤的一个主要目标,而肝脏的损伤又将使机体功能进一步恶化,SAP死亡病例中有83%的患者同时并发肝损伤,但其发病机制目前尚未完全明确,而且缺乏有效的治疗方法。目前,针对胸导管/肠系膜淋巴液在感染性休克、严重烧伤、创伤等情况中作用的研究认为,淋巴液可以作为机体严重损伤情况下细胞因子、细菌、内毒素移位的途径。丹参多酚酸作为传统中药丹参中的有效活性成分,具有调节血小板功能、增强机体抗氧化能力、改善微循环、改善细胞能量代谢等多种作用。本实验拟探究SAP并肝损伤的发病机制以及胸导管淋巴液引流、丹参多酚酸对SAP并肝损伤的治疗价值,为临床应用提供实验依据。方法:将144只健康雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠根据实验设计分组,并进一步按分组制模,分为:腹部假手术+颈部假手术组(Sham operation group,SO组),腹部假手术+颈部胸导管引流组(Drainage of thoracic duct group,D组),SAP+颈部假手术组(SAP group,SAP组),SAP+颈部胸导管引流组(SAP+Drainage of thoracic duct group,SD组),SAP+丹参多酚酸注射组+颈部假手术组(SAP+Injection of drug,SI组),SAP+丹参多酚酸注射组+颈部胸导管引流组(SDI组)。每个模型组按时间点2小时、6小时、12小时,随机分为3个亚组(8只/组)。实验采用经胰胆管逆行注射5%牛磺酸胆酸钠(sodium taurocholate)诱导大鼠重症急性胰腺炎后,根据分组情况,给予胸导管穿刺置管引流淋巴液以及静脉注射丹参多酚酸干预,SAP制模处理后2h、6h、12h经腹主动脉取血处死动物,观察并收集腹水、血液、胰腺以及肝脏组织;以去致热原Eppendorf管收集淋巴液样本,并每小时更换容器;检测血清淀粉酶(AMY)、血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性,血浆内毒素(Endotoxin)含量,胸导管淋巴液内毒素、淀粉酶含量,肝脏过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;显微镜下观察胰腺及肝脏病理变化。结果:1SO组与D组大鼠各时点胰腺及肝脏病理评分、血清ALT、AST、AMY含量、血浆内毒素含量,血清和肝脏CAT、GSH-Px活性无显著差别(P>0.05);在各相应时点,SAP组、SD组、SI组及SDI组的血和肝脏CAT、GSH-Px活性明显低于SO组和D组(P<0.05),而其他指标则较SO组和D组明显升高(P<0.05);2在各相应时点,SD组、SI组及SDI组大鼠的胰腺及肝脏病理评分、血清ALT、AST、AMY含量、血浆内毒素含量明显低于SAP组(P<0.05),而血清和肝脏CAT、GSH-Px活性明显高于SAP组(P<0.05);3与相应时点SD组相比,SDI组大鼠2h的胰腺病理评分、血清ALT、AMY含量明显降低(P<0.05),而血清和肝脏GSH-Px活性明显升高(P<0.05);SDI组6h、12h的胰腺和肝脏病理评分、血清ALT、AST、AMY含量,血浆内毒素含量明显降低(P<0.05),而血清和肝脏CAT、GSH-Px活性明显升高(P<0.05);4与相应时点SI组相比,SDI组大鼠2h的胰腺病理评分、血清ALT、AST、AMY含量明显降低(P<0.05),而血清和肝脏GSH-Px活性明显升高(P<0.05);SDI组6h、12h的胰腺和肝脏病理评分、血清ALT、AST、AMY含量,血浆内毒素含量明显降低(P<0.05),而血清和肝脏CAT、GSH-Px活性明显升高(P<0.05);5与相应时点SD组相比,SI组大鼠6h的血清ALT含量明显降低(P<0.05),而血清AST含量、血清和肝脏GSH-Px活性明显升高(P<0.05);SI组12h的胰腺和肝脏病理评分、血浆内毒素含量明显降低(P<0.05),而肝脏GSH-Px活性明显升高(P<0.05);6除SDI组大鼠肝脏6h与12h的GSH-Px活性无明显差别(P>0.05)之外,SAP组、SD组、SI组、SDI组各组大鼠胰腺及肝脏病理评分、血清ALT、AST、AMY含量、血浆内毒素含量随时间延长逐渐升高(P<0.05),而血清和肝脏CAT、GSH-Px活性随时间延长逐渐降低(P<0.05);7D组大鼠胸导管淋巴液中AMY及内毒素含量随时间延长无明显变化(P>0.05),且明显低于相应时点SD组及SDI组(P<0.05);8与SD组相比,SDI组大鼠胸导管淋巴液AMY及内毒素含量在各相应时点均明显降低(P<0.05);9与同一组大鼠的胸导管巴液中物质含量相比,D组血浆内毒素无显著差别(P>0.05),血清AMY含量明显升高(P<0.05),而SD组及SDI组血清AMY和血浆内毒素含量明显降低(P<0.05)。结论:1大鼠重症急性胰腺炎早期即可引起肝脏功能损伤以及病理损伤性形态学变化。2大鼠重症急性胰腺炎早期即可发生血液和肝脏中抗氧化酶(CAT、GSH-Px)活性的下降,导致机体抗氧化能力的降低。3大鼠重症急性胰腺炎早期,血液和淋巴液中内毒素及淀粉酶含量即可明显增高,且淋巴液中含量明显高于血液中,说明淋巴液是肠源性内毒素和胰酶播散的一条重要途径。4胸导管引流和静脉注射丹参多酚酸均可降低重症急性胰腺炎大鼠血液及淋巴液中内毒素和胰酶含量,增强大鼠血液及肝脏中抗氧化酶活性。5胸导管引流和静脉注射丹参多酚酸均可有效抑制大鼠重症急性胰腺炎时胰腺和肝脏损伤,且两者合并干预对胰腺及肝脏损伤的作用效果较单一干预更明显。
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