β细胞是体内胰岛素的主要来源，在维持血糖平衡中起着关键作用。β细胞不仅仅是分泌胰岛素的加工厂，而且还精细调节胰岛素的分泌，使血糖在较窄的范围内保持稳定。近年来，随着人们生活水平提高及生活方式的改变，2型糖尿病的发病率呈现逐年增加的趋势，进行性β细胞功能衰减直至β细胞功能衰竭是2型糖尿病发生发展的重要机制。对β细胞的研究也成为了糖尿病药物治疗研究的主要方向。条件性基因打靶是在常规基因打靶的基础上，结合重组酶介导的位点特异性重组技术发展而来的一种基因打靶技术。它可以将对特定基因的修饰限制于特定类型的细胞、组织甚至小鼠发育的特定阶段。基于Cre/LoxP系统的条件基因打靶，通常借助同源重组将两个LoxP位点置于靶基因中编码重要功能域外显子的两侧内含子序列中，从而获得表型正常的Flox小鼠；而后将该LoxP位点修饰的小鼠与细胞或组织特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠杂交后，可望获得组织特异性基因剔除小鼠。其中Cre重组酶只在特定的细胞或组织中表达，并且Cre/LoxP位点依赖的重组会将该细胞中的靶基因剔除，而其它类型细胞中由于没有Cre重组酶的表达，靶基因不会被删除而仍然保持原有的表达模式。这样，就为我们研究某些删除后导致胚胎期致死的基因功能提供了很好的研究工具。基因敲除小鼠模型的应用为研究哺乳动物基因功能提供了可靠的方法。本研究以胰岛素2基因（Ins2）的第三个外显子为靶位点，利用新型的基于λ噬菌体Red重组系统的重组工程技术，构建在胰腺β细胞中特异性表达Cre重组酶的基因敲入型打靶载体，为获得胰腺β细胞中基因特异性敲出小鼠模型提供关键材料。本研究以低拷贝质粒pBR322为骨架构建取获载体（retrieving vector），应用缺口修复(Gap-Repair)的方法在λ噬菌体Red重组酶的作用下，通过同源重组亚克隆了长度约为12kb Ins基因；同时构建一个带有内部核糖体进入位点(IRES)序列、Cre重组酶序列和正负向筛选标记基因的微型打靶载体（mini-targeting vector），最后通过同源重组获得Ins2-Cre打靶载体，实现了打靶载体的快速构建，为获得胰腺β细胞特异性表达Cre重组酶的动物模型提供重要材料。