柳树具有速生、成材早等优点,并且具有一定的抗旱、耐盐、耐瘠薄、抗风沙能力,在维持生态平衡中起着很重要的作用,同时也是良好的园林绿化树种。试验以柳树优良杂交品种J795、J797和J799的茎段为外植体建立了无菌快繁体系,研究了影响愈伤组织诱导的各种因素及继代增殖情况,对愈伤组织的形态解剖结构进行了石蜡切片观察研究,同时对柳树的遗传转化进行了初步研究探索。主要研究结果如下:1.柳树无菌快繁体系的建立:以柳树的茎段为外植体建立无菌快繁体系,其诱导培养基为: MS和MS+6-BA0.5mg/L +NAA0.2mg/L。继代培养中采用高低生长激素交替使用,效果较好。培养基为: MS+6-BA0.1mg/L +NAA0.05mg/L, MS+6-BA0.2～0.3mg/L +NAA0.1mg/L生根培养基:(1)1/2MS,(2)MS +NAA0.2mg/L。2.愈伤组织的诱导中,适于柳树叶片愈伤诱导的激素配比为:MS+NAA(0.5～1.0)mg/L +2.4-D(0.2～0.5)mg/L, MS+BA(1.0～2.0)mg/L +NAA(0.5～1.0)mg/L。KT、ZT、TDZ等不适合愈伤组织的诱导。愈伤组织继代培养中,细胞分裂素6-BA的浓度高于6mg/L时容易产生玻璃化现象。TDZ在愈伤组织继代培养中作用时间较长,4～6个月仍可以保持生活力。试验中偶尔得到部分再生植株,有器官直接再生也有通过愈伤组织间接再生成苗,但是诱导率很低,而且大多不能进一步分化繁殖,在以后的培养中逐渐黄化死亡。3.愈伤组织的细胞学观察对得到的愈伤组织进行分类及细胞观察,结果表现了形态结构的一致性,石蜡切片显示,叶片组织脱分化的起始部位在微管束鞘;胚性细胞多发生在所形成的愈伤组织的表层或近表层,和非胚性细胞在形态和细胞学上有很大差别,细胞核大、质浓,与周围细胞存在生理隔离;多细胞原胚以平周分裂为主,并由此表现出有序生长;胚性细胞内含有丰富的淀粉粒,随细胞的分裂和分化逐渐减少。4.柳树遗传转化的初步研究以茎段为外植体进行了农杆菌介导的转化研究,对柳树的遗传转化进行了初步探讨,摸索了转化体系的选择压及以茎段为材料进行了初步浸染试验,得到了3株抗性植株,分子检测证明为假阳性植株。柳树遗传转化的再生体系的构建还需继续探索。