盖他病毒（Getah virus,GETV）严重威胁着社会公共的健康与安全。到目前为止,它已蔓延到欧亚大陆和泛太平洋地区的12个国家。GETV对马、猪的高致病性,给养殖业造成了巨大的经济损失。1962年之后,全世界范围内出现了七次大规模的马群中GETV的暴发。1965年,日本首次报道了GETV感染猪群的情况,之后该病毒迅速传播到亚洲。近些年在中国,GETV的流行状况变得越来越糟糕。马感染GETV的临床表现常包括发热、全身皮疹、后肢水肿。受感染的仔猪表现出抑郁、震颤,母猪感染后会出现高死亡率和流产。尽管该病毒给社会造成巨大威胁,然而,GETV的流通、分布和演变还不是很清楚。因此,有必要对GETV加大检测技术研究,降低风险。考虑到传统技术如病毒分离、细胞培养等耗时较长,操作复杂,成本较高,而且难以处理大批量样本,而ELISA靠着其灵敏、简便、迅速等优点非常适合临床上大批量样本的检测,故本研究构建ELISA检测方法,为后期检测技术的发展提供科学依据。本研究包括以下三个内容:1.GETV-E2蛋白的诱导表达以及纯化GETV-E2蛋白是GETV关键性的蛋白,十分稳定。GETV致病性的基因标志位于E2蛋白,且大多数检测技术识别的关键蛋白也是该蛋白。本研究表达并纯化了E2蛋白,约为46 KD,浓度为1.96μg/μL。通过WesternBlot分析鉴定,该E2蛋白具有免疫原性,可以作为ELISA的包被抗原。2.猪-GETV间接ELISA方法的建立与应用本研究建立了猪-GETV间接ELISA抗体检测方法。此ELISA方法特异性强、敏感性较高、重复性较好;通过将ELISA与IFA做比较,符合率为94.96%。本研究应用此法,分析了三个方面的内容。首先,分析了样本来源与猪-GETV阳性率的关系。14个省份338份猪-血清的总阳性率为34.72%,说明全国范围内GETV的感染率比较高。其次,分析了季节与猪-GETV阳性率的关系。4月份时收集了169份血清阳性率为22.49%;10月份时采集168份血清阳性率为47.02%,显著高于4月份。最后,分析了年龄与猪-GETV阳性率的关系。7日龄-21日龄的阳性率为38.75%,而40日龄-70日龄和3月龄-5月龄的阳性率分别为28.75%、29.90%,有所下降,但8月龄-10月龄的阳性率为42.50%,出现了上升的趋势。3.马-GETV间接ELISA方法的建立与应用本研究建立了马-GETV间接ELISA抗体检测方法,且特异性强、敏感性高、重复性好;通过将ELISA与IFA比较,符合率为97.87%。本研究应用此法,分析了两个方面的内容。第一,分析了样本来源与马-GETV阳性率的关系。荷兰、日本、爱尔兰、澳大利亚共328份马血清,总阳性率为31.71%。其中荷兰和爱尔兰的阳性率较低,分别为23.17%和4.88%,而日本和澳大利亚阳性率较高,分别为45.12%和53.66%。第二,分析了年龄与马-GETV阳性率的关系。1-3岁的阳性率为32.53%,而3-4岁和4-5岁的阳性率分别为23.00%,27.14%,有所下降,但5-7岁的阳性率为41.33%,出现了上升的趋势。综上所述,本研究建立了猪-GETV、马-GETV间接ELISA抗体检测方法,初步了解到中国猪群中GETV的感染率较高,且来自四个国家的马中GETV的阳性率也不低,故应该增加GETV的防控与研究。