以MUC1为基础制备肿瘤疫苗,是目前肿瘤疫苗研究的热门话题。但到目前为止有关MUC1疫苗的所有研究都是以人类MUC1为模板,人类MUC1免疫原性较弱,在人体实验中难以诱导有效的抗肿瘤细胞免疫。由于异源蛋白具有较强的免疫原性,因此利用异源蛋白研制肿瘤疫苗,已成为国内外学者研究肿瘤免疫治疗的新方法。本研究拟钓取小鼠Muc1基因,制备重组小鼠Muc1融合蛋白,为开发异源蛋白小鼠Muc1抗肿瘤疫苗奠定实验基础。我们根据GenBank的基因序列,通过RT-PCR扩增小鼠Muc1基因重复序列,获得小鼠Muc1 645bp基因片段;将该基因连入pMAL-p2原核表达载体,构建pMAL-Muc1表达载体;将pMAL-Muc1转化大肠杆菌,经SDS-PAGE及Western blot鉴定小鼠Muc1融合蛋白的正确性,经筛选获得高效表达小鼠Muc1蛋白的工程菌株;通过Amylose Resin亲和层析纯化小鼠Muc1融合蛋白;将重组小鼠Muc1融合蛋白免疫小鼠,通过ELISA检测小鼠血清中抗体效价,结果表明重组小鼠Muc1融合蛋白明显诱导小鼠产生抗Muc1特异性抗体;通过淋巴细胞转化试验结果显示,重组小鼠Muc1融合蛋白能够促进小鼠T细胞转化,激活小鼠细胞免疫应答。本研究成功制备了重组小鼠Muc1融合蛋白,并能诱导小鼠产生体液免疫应答和细胞免疫应答,而且与人MUC1发生了交叉反应,为进一步研究小鼠Muc1融合蛋白的免疫活性,开发新型抗肿瘤疫苗奠定了基础。