家兔面神经离断伤后面神经核细胞凋亡的表达与外周面神经病理变化

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背景慢性面神经损伤后的修复是一临床难点。只有外周神经系统损伤后可以再生,而在中枢神经系统体内神经细胞的轴突不能再生,周围神经损伤后虽有一定的再生能力,但往往也受很多因素影响。虽然国内外学者从细胞生物学和分子生物学角度作了大量研究,人体神经系统损伤后的再生,无论是中枢神经系统还是周围神经系统,尚未完全解决这个难题。面神经是人体最容易受到损伤的颅神经之一,损伤后多表现为不同程度的口角歪斜,闭眼不能等,不同程度的影响患者的生活质量,探索面神经损伤后的变化和促进修复有重要的意义。外周面神经损伤动物模型的建立是研究面神经有效方法之一,其中得到公认的为“Kreutzberg模型”[1]。面神经核神经元和其他神经细胞一样都为人体不可再生细胞,面神经损伤后可以导致运动神经元的死亡,因其损伤部位的不同,运动神经元死亡的时间不同。有证据提示外周面神经损伤后会引起面神经核中神经元细胞核数目减少[2, 3],外周面神经以及支配的面肌出现变性和再生共存。目的观察家兔面神经离断伤后面神经核的细胞凋亡和外周面神经以及支配的靶向肌肉随时间变化情况,进而了解面神经离断伤后形态学改变。方法随机数字法取选择新西兰家兔50只,随机选取一侧面神经总干制备面神经总干离断伤模型。随机分为对照组、术后3天组、7天组、14天组、1月组、2月组和3月组,选择左心灌注法处死实验家兔,分别取出家兔脑干和外周面神经和支配的面肌制成石蜡标本。HE指导下辨认出面神经核后行免疫荧光检测,观察面神经运动核神经元细胞凋亡;将外周神经肌肉组织标本制成组织芯片,分别行NSE、MG、NF、DES、S-100、CgA和SMA等蛋白的免疫组化检测。结果47只家兔进入结果分析,荧光显微镜下观察面神经运动神经元凋亡,IPP5.1软件统计HPR不同视野下家兔面神经运动核神经元细胞凋亡,面神经运动核在离断伤术7天组和14天组发生细胞凋亡和对照组有显著性差异(p<0.05)。术后3天组可见神经鞘膜解离和神经纤维球出现、术后7天组中神经球增生明显,术后7天组和术后14天组神经组织的NSE免疫组化染色增强,术后1月组未能修复的外周神经为纤维瘢痕组织替代。术后2月组减弱;离断伤术后4天组面肌肌纤维束解离,MG在术后1月组表达增多。NF、DES、S-100和CgA均可见包浆中阳性表达,SMA未见表达。结论家兔外周面神经离断后面,面神经运动核神经元细胞凋亡高峰期在术后14天组;神经离断后断端变性坏死同时伴有增生,其中NSE检测可作为面神经损伤急性期表现的参考指标之一,与面神经运动核细胞凋亡发生高峰期一致。面肌的失神经变化较神经相对迟缓约7-14天;MG的检测可作为面神经损伤急性期面肌再生功能的参考指标之一;NF以及S-100在面神经离断伤后神经断端的表达无明显的参考意义;DES在神经急性期损伤后面肌再生无参考意义;SMA在面肌中无表达
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