miR-122对局灶性脑缺血小鼠脑组织NLRP3表达的影响

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目的:探讨微小RNA-122(miR-122)在小鼠急性缺血性脑卒中中的作用及其作用机制。方法:120只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为6组,假手术组(Sham)、大脑中动脉阻塞组(MCAO)、miR-122模拟物注射组(MACO+miR-122 mimics)、miR-122模拟物阴性对照注射组(MACO+miR-122 mimics nc)、miR-122抑制物注射组(MACO+miR-122 inhibitor)、miR-122抑制物阴性对照注射组(MACO+miR-122inhibitor nc)。脑室注射miR-122 mimics、miR-122 mimics nc、miR-122 inhibitor、miR-122inhibitor nc后48 h电凝法建立永久性局灶性小鼠MCAO模型,采用Longa神经功能评分评估小鼠神经功能缺损程度;real time RT-PCR检测各组小鼠脑组织NOD样受体蛋白家族炎症小体3(NLRP3)的受体蛋白NLRP3、白介素1β(IL-1β)mRNA的表达差异;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色评估小鼠脑梗死体积;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测小鼠血清NLRP3、IL-1β蛋白表达;Western Blot检测小鼠脑组织NLRP3蛋白表达。结果:与Sham组相比MCAO组小鼠脑组织miR-122 mRNA表达轻度升高,NLRP3、IL-1βmRNA表达显著升高;real time RT-PCR、ELISA及Western blot的结果显示脑室注射miR-122 mimics模型小鼠脑组织及血清NLRP3和IL-1β表达量降低,差异均有统计学差异(P<0.05),脑室注射miR-122 inhibitor后模型小鼠脑组织及血清NLRP3和IL-1β表达量增高,差异均有统计学差异(P<0.05)。Longa神经功能评分结果显示脑室注射miR-122 mimics后可显著改善模型小鼠神经功能评分结果,差异有统计学差异(P<0.05)。TTC染色结果显示脑室注射miR-122 mimics可减小模型小鼠脑梗死体积,差异有统计学差异(P<0.05)。结论:MCAO模型小鼠中miR-122通过下调炎症因子NLRP3、IL-1β的表达发挥神经保护作用,从而减轻小鼠脑梗死体积。
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