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目的:建立致命鹅膏中毒实验猪的肝衰竭模型,为进一步研究鹅膏肽类毒素中毒机制、毒素检测及新药开发奠定基础。方法:(1)利用形态学、分子生物学及毒素检测的方法对致命鹅膏进行鉴定;(2)用纯水提取致命鹅膏,用反相高效液相色谱法检测致命鹅膏毒素含量;(3)将8只版纳微型猪随机分为空白对照组3只(n=3)及实验组5只(n=5),实验组以2mg/kg经口灌胃致命鹅膏提取液,染毒后观察两组中毒症状、肝功能、凝血功能(ALT、AST、TBIL、MYO、CK、CK-MB、LDH、APTT、PT)、组织病理及尿液毒素检测结果。结果:(1)中毒症状:实验组在75h内全部死亡,其中最早死亡时间是在染毒后第42h,最晚死亡时间是在染毒后第75h,实验组在第6-52h内出现不同程度的消化道及精神症状,如恶心、呕吐、腹泻、食欲下降及乏力等表现;而对照组均无死亡且无消化道症状。(2)血生化、凝血功能:染毒后实验组第28h ALT数值开始升高,第52h达到高峰,为234.00±112.30U/L(P<0.01);AST于第6h开始升高,第52h达到高峰,为13127.75±3506.19U/L(P<0.01);TBIL第12h开始明显高于对照组,于第72h达峰值130.9mmol/L(P<0.01);MYO于第28h明显升高,第72h达7898ng/m L(P>0.05);LDH第28h明显升高,第52h达峰值,为6492±1436.23U/L(P<0.05);CK数值于第72h达峰值为37572.00U/L(P>0.05);CK-MB数值于第52h达到高峰,为3263±2488.31U/L(P<0.05),APTT于第39h升高至44.6±17.68S(P<0.05);PT于第39h升高至78.15±17.75S(P<0.05)。(3)病理改变:(1)肝脏:实验组肝脏外形正常,红褐色,肝动脉、门静脉无扩张,胆囊无肿大;触之柔软,肝脏膈面及脏面出现不同程度的灶状或斑片状出血。光镜下:低倍镜下见肝小叶结构不同程度的破坏;高倍镜下可见肝索结构破坏,肝细胞肿胀,核固缩、核破裂、核溶解等细胞坏死表现,部分肝细胞出现脂肪变和胆汁酸结晶,而汇管区、中央静脉未见明显改变。(2)心脏:肉眼观心脏外形正常,质韧,表面血管走形正常,无出血,沿室间隔剖开展平,观察心内膜面,可见心房内膜、二、三尖瓣流出道部位片状出血灶。光镜下:低倍镜下可见心肌间质片状出血灶,高倍镜下可见正常心肌细胞,伴大量红细胞,部分伴淋巴细胞浸润。(3)肾脏:肉眼观外形正常,红褐色,质韧,无出血,沿冠状面剖开,肾盂肾盏走形正常。光镜下:低倍镜下见肾小体结构完整,高倍镜下见肾小球结构完整,肾小管上皮细胞肿胀,部分近曲小管细胞坏死、管腔塌陷。(4)尿液毒素检测:染毒后第6h,实验组尿液中检测出α-鹅膏毒肽,为15.73±3.79μg/m L,24h以后未检测出。结论:我们通过形态学及分子生物学鉴定确定的致命鹅膏的种属;通过反向高效液相色谱法检测了致命鹅膏中鹅膏肽类毒素的种类及含量;结合实验动物的中毒症状、实验室检查、毒素检测及组织病理学特点,我们初步构建了版纳微型猪致命鹅膏中毒肝衰竭模型。