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目前,葡萄籽原花青素的测定方法较多,但没有一个统一的检测方法。本文对葡萄籽原花青素的检测方法进行了研究,以葡萄籽超微粉产品为样品进行了原花青素含量的测定,同时对葡萄籽超微粉中原花青素的提取方法进行了研究。本研究得到以下结果:1确定了铁盐催化比色法的测定条件,方法线性范围10~200μg/mL,检出限3μg/mL。RSD为1.40%(n=9),回收率为96.0%~108.4%。本方法准确、灵敏、稳定、操作简便,适用于葡萄籽超微粉中原花青素的含量分析,原花青素含量为9.56%。2福林肖卡-HPLC结合法测定葡萄籽原花青素。福林肖卡法测定的是多酚含量,以儿茶素作为对照物。改进后的HPLC条件对没食子酸、儿茶素、表儿茶素分离效果较好。经测定,葡萄籽超微粉中多酚含量10.91%,三种单体总量1.21%,以多酚含量与三种单体总量之差表示原花青素含量,原花青素含量为9.70%。3香草醛-HPLC结合法测定葡萄籽原花青素。香草醛法测定了黄烷-3-醇单体和原花青素的总量,HPLC法测定了黄烷-3-醇单体的含量,两者之差表示原花青素的含量。确定了香草醛比色法测定条件,以儿茶素为对照物,线性范围5~200μg/mL,检出限1μg/mL,RSD为1.69%(n=9),回收率为91.0%~118.0%。经测定,葡萄籽超微粉中的原花青素含量为7.07%。4针对原花青素的检测,选择较大的料液比,以甲醇为葡萄籽超微粉原花青素的提取溶剂。正交实验结果表明,提取次数对原花青素的提取率有显著影响,其它因素的影响不显著。确定的提取工艺如下:超声波频率40KHz,料液比1:200,提取温度40℃,每次提取时间45min,提取3次。5通过对三种测定方法的评价与比较,铁盐催化比色法为葡萄籽超微粉原花青素测定的最佳方法,其测定步骤如下:(1)提取:准确称取葡萄籽超微粉0.25~1.0g,以甲醇为提取溶剂,超声波频率40KHz,料液比1:200,温度40℃,提取时间45min,提取3次。合并提取液,离心,稀释并定容至合适的检测浓度。(2)测定:移取1.0mL样品溶液于10mL刻度试管中,加入9.0mL体积比为83:6:1的正丁醇:浓盐酸:10%硫酸铁铵的反应混合液,塞紧塞子,摇匀,置于沸水浴中加热40min后,立即取出用冰水快速冷却4~5min,取出,待恢复至室温(约15min),在550nm处以试剂空白调零,测定吸光值。