目的:本文以具有清热泻火、解毒之功效的经典方剂黄芩清肺汤为研究对象，利用LC-MS/MS和UPLC等先进分离分析技术，采用离体肠外翻吸收模型和Caco-2细胞模型、大鼠离体肝微粒体温孵技术等手段，研究复方多种有效成分吸收、代谢等药代动动力学过程，探寻药效物质基础和作用机制，为中药复方研究提供一种有益的模式。　　方法与结果:　　1.黄芩清肺汤的主要成分分析　　建立了同时测定黄芩清肺汤中黄酮类(黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素、野黄芩苷、千层纸素-A)、环烯醚萜类（栀子苷、京尼平、京尼平酸）、有机羧酸酯类（绿原酸）和色素类（西红花苷-Ⅰ）成分的液相-串联质谱联用(LC-MS/MS)测定方法。结果表明各成分线性关系良好，方法快速、准确。研究结果为更好地控制黄芩清肺汤质量提供了科学依据，并为体内药代动力学研究所需的质量稳定可靠的供试样品提供了保证。　　2.黄芩清肺汤主要成分体内分析方法的建立与应用比较　　大鼠灌胃给予黄芩清肺汤及单味药组，给药前及给药后不同时间点采集血样，血浆经乙腈沉淀蛋白后测定其中待测组分，LC-MS/MS法测定复方及不同配伍中各组分在大鼠体内的血药浓度。应用DAS2.0软件获取AUC0-t和CLz等药动学参数，比较各组分的药动学差异。结果表明:①黄芩有效成分黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素和野黄芩苷的Cmax和AUC0-t值在单味药中较高;②栀子有效成分栀子苷和京尼平苷酸，其Cmax和AUC0-t值在全方中较高，且清除率较低，说明栀子配伍黄芩后增加了栀子苷、京尼平苷酸和绿原酸入血吸收程度，有利于药效持续发挥。　　3.黄芩清肺汤离体肠囊外翻模型肠吸收研究　　采用离体肠囊外翻模型，运用UPLC技术测定黄芩清肺汤及各单味药组中黄酮、环烯醚萜类、有机酸酯三类和色素类等有效成分在大鼠十二指肠、空肠、回肠和结肠2h内药液透过肠囊的质量浓度，计算各有效组分分别在四个肠段的累积吸收量(Q)和吸收速率常数(Ka)。结果表明，小肠中十二指肠、空肠、回肠和结肠四个肠段对黄芩清肺汤9种活性成分的吸收强弱顺序依次为黄芩苷＞栀子苷＞西红花苷-Ⅰ＞汉黄芩苷，汉黄芩素＞京尼平酸＞野黄芩苷，京尼平＞绿原酸。　　4.Caco-2细胞模型研究黄芩清肺汤及其单味药提取物吸收特征研究　　利用MTT实验筛选出黄芩清肺汤提取物主要成分及单味药组在Caco-2细胞上的安全浓度，考察P-糖蛋白(P-gp)抑制剂及MRP2抑制剂对单体组转运的影响，比较不同配伍情况下全方有效组分的细胞转运吸收差异。结果表明:①黄芩苷会影响栀子苷的肠吸收，较栀子苷单体而言，在一定配比下（黄芩苷∶栀子苷=3∶1）能促进其吸收。②栀子苷主要为被动扩散，可能还包括细胞旁路转运，但可能会受外排转运蛋白P-gp的调控;③比较相同浓度单体而言，黄芩清肺汤中两指标成分单体混合物（黄芩苷∶栀子苷=3∶1）和复方中栀子苷吸收显著增加，推测可能是由于黄芩苷或复方中其它成分起类似(P-gp)抑制剂作用，抑制栀子苷外排，促进其吸收。　　5.黄芩清肺汤对克拉霉素在大鼠体内的药代动力学影响　　建立克拉霉素在大鼠血药浓度的LC-MS/MS测定方法，研究黄芩清肺汤单次给药及多次给药对克拉霉素药代动力学参数的影响，采用DAS2.0软件进行药代动力学参数计算。结果表明，黄芩清肺汤单次给药后与对照组比较，克拉霉素的药代动力学参数AUC0-t值分别为（9894.09±1408.45μg/L·h）和(3877.34±162.36μg/L·h)，具有显著性差异;黄芩清肺汤多次给药后与对照组比较，克拉霉素药代动力学参数AUC0-t值分别为（6109.433±505.74μg/L·h）和(4086.72±106.44μg/L·h)，有显著性差异。说明黄芩清肺汤单次与多次给药，均能提高克拉霉素体内暴露量。　　6.黄芩清肺汤及其主要药效成分与克拉霉素体外相互作用研究　　采用建立CYP4505种亚型探针底物的代谢产物的LC-MS/MS分析方法，利用化学抑制剂方法鉴别参与克拉霉素体外代谢的5种CYP450亚型酶。结果表明，克拉霉素主要由CYP3A1/2代谢，CYP1A2及CYP2E1部分参与克拉霉素的代谢;将黄芩清肺汤及其主要药效成分与CYP450酶各个探针底物共同孵育，考察代谢产物的生成速率，研究黄芩清肺汤及其主要药效成分对CYP450的5个亚型(CYP1A2、CYP2C11、CYP2D6、CYP2E1、CYP3A1/2)活性的抑制程度。结果表明，除黄芩苷外，黄芩清肺汤及单味药、栀子苷对CYP3A1/2、CYP1A2及CYP2C11酶有很强的抑制作用;在大鼠肝微粒体体外孵育体系中，将黄芩清肺汤及其主要药效成分与克拉霉素共同孵育，通过克拉霉素的消除量来反映黄芩清肺汤及其主要药效成分对克拉霉素代谢消除的影响。结果表明，黄芩清肺汤及主要药效成分通过对CYP3A1/2、CYP1A2和CYP2E1的抑制作用，能显著抑制克拉霉素在大鼠肝微粒体中的代谢，且呈现剂量依赖性，使其生物利用度升高。　　通过对黄芩清肺汤、单味药及主要成分对CYP450酶的抑制或诱导作用研究，提示应注意安全和合理联用含同样药材或成分的中药和由CYP3A1/2及CYP1A2酶介导的药物。　　结论:本文建立了准确、可靠的LC-MS/MS方法用于黄芩清肺汤及单味药材组黄酮、环烯醚萜类和有机羧酸酯三类化合物11个化学成分的含量测定，方法简便快速灵敏;其次对黄芩清肺汤在大鼠体内的多组分药代动力学进行了系统研究，再次，运用大鼠外翻肠囊模型和Caco-2模型对黄芩清肺汤中有效成分及其单味药的吸收特征研究及其机制进行研究;最后，通过研究黄芩清肺汤主要药效成分对克拉霉素的作用，发现其在体外能够抑制克拉霉素的代谢，体内提高克拉霉素的体内暴露水平，研究结果能为合理评价临床中西药联合使用提供依据。