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目的:通过分别检测依他尼酸(Ethacrynic acid,EA)作用下人肺腺癌SPCA-1、大细胞癌NCI-H-460、小细胞癌NCI-H-446细胞株中谷胱甘肽S转移酶-π(Glutathione S-transferasesπ,GST-π)的蛋白表达水平、酶活性及三种细胞在顺铂、阿霉素、VP-16三种化疗药物分别作用下的细胞生存率,来研究GST-π表达及活性的变化与三种肺癌细胞对该三种化疗药耐药的相关性。方法:将一定密度、生长状态良好的SPCA-1、NCI-H-460、NCI-H-446肺癌细胞,分别随机分为实验组(加入EA,浓度分别为60、80、100、160μmol/L,作用时间24h)和对照组,采用免疫荧光细胞化学方法检测各组细胞中GST-π的蛋白表达水平,采用紫外分光光度法检测GST-π酶活性。进一步通过MTT方法,分别检测实验组和对照组三种细胞,在顺铂、阿霉素、VP-16分别作用下的细胞生存率,并计算出细胞半数致死药物浓度IC50。采用SPSS11.5统计软件对数据进行统计分析。结果:1.免疫荧光细胞化学方法检测结果,GST-π蛋白表达水平显示,SPCA-1及NCI-H-446细胞实验组的荧光强度明显弱于对照组,提示EA可以抑制SPCA-1、NCI-H-446细胞GST-π的表达,并且GST-π表达水平与EA具有一定的浓度依赖关系,随EA浓度增高表达逐渐减少,而NCI-H-460细胞实验组荧光强度较对照组未见明显变化, EA对NCI-H-460细胞GST-π的表达未见明显的抑制。2.紫外分光光度法检测GST-π酶活性结果显示,SPCA-1、NCI-H-460、NCI-H-446三种细胞对照组间GST-π酶活性未见显著差异,实验组较对照组GST-π酶活性抑制率分别为23.96%、30.80%、24.12%,三组细胞间酶活性抑制率未见显著差异。3.MTT法检测细胞生存率结果示:三种细胞对照组对顺铂的敏感性依次为,SPCA-1细胞株>NCI-H-446细胞株>NCI-H-460细胞株,并有显著统计学意义;NCI-H-460及NCI-H-446细胞较SPCA-1对阿霉素更加敏感,前两者的阿霉素IC50明显低于后者,并有显著统计意义;三种细胞株对VP-16的敏感性未见明显差别。NCI-H-446细胞在顺铂、阿霉素作用下,实验组与对照组相比,IC50均明显降低,并有显著统计学意义(P<0.05),实验组对化疗药更加敏感。SPCA-1细胞在顺铂、阿霉素作用下,实验组较对照组IC50减低,但无显著统计学意义。NCI-H-460在顺铂、阿霉素作用下,实验组与对照组IC50未见明显差别。三种细胞在VP-16作用下,实验组与对照组IC50均未见明显差别。结论:本实验研究结果表明:EA可以抑制SPCA-1、NCI-H-460、NCI-H-446肺癌细胞株GST-π活性,并能抑制SPCA-1、NCI-H-446细胞GST-π蛋白水平的表达。NCI-H-446细胞在EA作用下,对顺铂、阿霉素的IC50均降低,化疗敏感性增强。研究表明,降低GST-π表达及活性,可以提高NCI-H-446细胞对顺铂、阿霉素化疗的敏感性,也提示不同肺癌类型的患者,对化疗药物的敏感性各不相同,可采用其相关耐药蛋白的抑制剂来提高肿瘤化疗的敏感性,这一方法可为肺癌的化学治疗提供一个新方向。