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目的：研究原发性肝细胞肝癌(HCC)中MOB2的表达及其与HCC临床病理特征关系。方法：采用免疫组织化学法检测50例肝癌及其癌旁组织中MOB2蛋白表达情况,并分析其与肝细胞癌的临床病理因素之间的关系。结果：免疫组化结果显示50例肝癌组织中MOB2蛋白阳性表达率为40%,相对应的癌旁组织MOB2的蛋白表达为96%。肝癌组织中MOB2的表达明显低于相应的癌旁组织,其差异具有统计学意义,(P<0.05)。MOB2在肝癌组织蛋白表达率明显低于癌旁组织,(P<0.05)；MOB2蛋白在肝癌组织中的表达与性别、肿瘤大小、AFP水平、患者血清HBsAg是否阳性、Edmondson分级、有无门静脉癌栓无关(P>0.05)。结论：MOB2蛋白缺失可能与肝癌细胞的发生、发展、侵袭、转移过程有关。MOB2有望成为一个新的分子指标,可用于肝细胞癌的诊断、治疗和监测患者的预后。目的：从人脐静脉内皮细胞提取总RNA,利用RT-PCR法反应获得目的基因MOB2的cDNA片段,构建具备可进行细胞转染和容易被识别筛选的pEGFP-Cl-MOB2质粒载体。方法：应用Trizol法从人脐静脉内皮细胞中提取1nRNA,按照GeneBank公布的MOB2基因序列设计引物：5’端引物：5’-CCCAAGCTTCCATGGACTGGCTCATGGGGAAGTC-3’;下游引物：5’-CGGGGTACCTCATCTCCTTCACGTGGTTCTG-3’。 RT-PCR反应获得734bp大小的MOB2cDNA片段。MOB2和载体pEGFP-Cl用Hindll、 Kpnl进行双酶切,二者进行连接,构建包含目的基因MOB2的重组质粒pEGFP-Cl-MOB2。结果：使用Trizol法分离和提取得到人脐静脉内皮细胞提取总RNA,通过RT-PCR法反应获得目的基因MOB2的cDNA片段,构建完成了能够稳定表达和具有筛选特征的pEGFP-Cl-MOB2质粒载体,供后续转染和表达实验使用。结论：Trizol法简便快速提取到人脐静脉内皮细胞提取总RNA,RT-PCR法准确地获得目的基因MOB2的cDNA片段,正确构建完成了pEGFP-Cl-MOB2质粒载体目的：对重组pEGFP-Cl-MOB2质粒载体进行扩增、纯化,将重组载体转染入肝癌SMMC-7721细胞中,筛选出阳性细胞克隆；并研究转染MOB2对SMMC-7721细胞的生长和侵袭力是否会受到影响,是否会有显著的细胞凋亡出现,探讨MOB2是否会影响SMMC-7721的细胞周期进展和分布比例,以判断MOB2在肝细胞癌的发生和进展方面是否扮演着关键性的作用。方法：采用脂质体Lipofectamine2000介导pEGFP-Cl-MOB2在肝癌SMMC-7721细胞处于对数生长期进行转染,并采用含G418的培养基筛选一获得阳性克隆的整合了基因的MOB2基因的SMMC-7721细胞,继续传代培养。 Western blot检测转染前后MOB2蛋白量,MTT法检测细胞增殖变化,Transwell小室测定细胞的体外侵袭能力。流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期变化情况。软琼脂克隆形成实验检测细胞体外成瘤实验。结果：转染MOB2基因后肝癌SMMC-7721细胞的生长增殖受到了显著的抑制,说明转染MOB2可以起到抑制肝癌细胞的过度增长；转染MOB2基因后肝癌SMMC-7721细胞的侵袭能力显著降低,说明转染抑癌基因MOB2可以抑制肝癌SMMC-7721细胞的侵袭转移能力。结论：重组质粒pEGFP-Cl-MOB2成功转染肝癌SMMC-7721细胞,筛选获得包含MOB2的阳性克隆SMMC-7721细胞。转染MOB2基因后SMMC-7721细胞生长增殖受到显著的抑制、迁移能力下降,MOB2通过阻滞肝癌SMMC-7721的细胞细胞周期进展诱导细胞的凋亡