水通道蛋白1、4表达与肝纤维化分期的相关性研究

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目的:乙型肝炎病毒呈世界性流行,长期慢性乙型肝炎感染是导致肝纤维化的最主要原因,最终导致肝衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌。水通道蛋白(aquaporins,AQP)是一组对水有高度选择性的细胞膜跨膜转运蛋白,在水的分泌吸收、细胞内外水平衡等过程中起着重要作用,研究表明水通道蛋白参与多种疾病过程,也在肝硬化新生血管形成、门静脉高压中起着重要作用,本文探讨慢性乙型肝炎患者AQP1、AQP4和α-SMA在肝脏组织表达与病理肝纤维化分级分期之间相关性。  研究方法:1、选取临床进行肝组织活检的慢性乙型肝炎患者61例,对肝脏穿刺活检组织进行常规HE染色,应用Scheuer系统评估所有患者的纤维化分级和炎症分期,依据病理纤维化分期分为S0,S1,S2,S3,S4期。2、应用Leica Bond-Max全自动免疫组化机,采用免疫组化方法测定肝穿组织中AQP1、AQP4和α-SMA表达、定位。3、采用尼康BR4.0软件对所有免疫组化切片进行平均光密度值(OD值)半定量分析。4、培养肝星状细胞,采用细胞免疫组化方法进行AQP1、AQP4免疫组化染色。5、采用SPSS22.0软件进行数据分析,以P<0.05为差异有统计学意义,不同纤维化分级的IOD值均数比较采用秩和检验,相关性分析采用spearman相关。  结果:在对照组中,AQP1主要表达在动脉、门脉血管的内皮细胞和胆管上皮细胞,而在肝血窦内皮细胞表达非常少;在纤维化进展中,AQP1部分表达在肝血窦内皮细胞,大量表达在增殖的动脉毛细血管内皮细胞、胆管上皮细胞,与肝再生结节形成密切相关,并随着纤维化进展表达量增加。AQP4不仅在肝胆管细胞表达,在肝星状细胞也有表达,随肝星状细胞激活其表达增加。同时,在细胞水平发现AQP4在肝星状细胞表达,在细胞壁呈强阳性。α-SMA的表达主要分布于肝窦壁、汇管区、纤维间隔和炎细胞浸润区,尤其带分支突起的梭形细胞(活化的HSC)有大量表达。AQP1、AQP4和α-SMA的表达随肝组织病变分级、分期进展而渐增强(P<0.05),与肝纤维化分级呈明显正相关(P<0.05)。AQP1、AQP4在纤维化不同分期表达有统计学差异(P<0.05)。  结论:AQP1、AQP4和α-SMA的表达与肝组织病变纤维化分级、炎症分期密切相关,并随着纤维化进展其表达量增加。AQP1主要表达在新生毛细血管内皮细胞,参与肝纤维化新生血管形成,而AQP4可见表达在肝星状细胞,并随着肝星状细胞活化其表达量增加,可能参与肝星状细胞的活化过程,故AQP1、AQP4有可能成为治疗、调控肝纤维化的一个重要靶点。
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