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本文研究目的:观察肌肽对离体大鼠晶状体激素性白内障形成的抑制作用。
研究方法:Sprague-Dawley大鼠的220只透明晶状体随机分为五组:正常对照组(A:DMEM),地塞米松组(B:DMEM+地塞米松10μM),低浓度肌肽治疗组(C:DMEM+地塞米松10μM+肌肽2mM),高浓度肌肽治疗组(D:DMEM+地塞米松10μM+肌肽5mM),肌肽组(E:DMEM+肌肽5mM)。分别放入含培养基的无菌24孔板中,于37℃下,置50mL/LCO2细胞培养箱中培养,隔日换液。培养中每天用解剖显微镜观察晶状体,记录晶状体混浊程度。培养第1、3、5、7d分别从各组取10只晶状体,测定晶状体中的谷胱甘肽含量和过氧化氢酶、谷胱甘肽还原酶及Na+-K+ATP酶活性。7d从对照组、白内障组和肌肽治疗组各取2只晶状体制作HE染色切片,光镜下观察大鼠晶状体组织学改变。
研究结果:培养7d,对照组和肌肽组仅产生晶状体雾状混浊,白内障组晶状体出现重度核混浊,而肌肽治疗组仅在晶状体核和皮质间出现可见的分界。
光镜下可见对照组大鼠晶状体纤维细胞为六边形细胞,位于晶状体浅层的细胞可见细胞核,但随着向晶状体内深入,细胞的细胞核及细胞器逐渐减少到消失。晶状体纤维细胞之间排列非常紧密,细胞层次整齐。两个肌肽治疗组大鼠晶状体形态与对照组类似,晶状体纤维细胞之间排列非常紧密,细胞层次整齐。地塞米松组晶状体纤维细胞出现水肿,深层纤维之间出现裂隙。浅层纤维细胞内出现大量的空泡样结构,使纤维细胞的结构被破坏,纤维之间的紧密排列变的紊乱,晶状体细胞层次紊乱。晶状体纤维失去正常结构,有的断裂、崩解。细胞间隙加宽。
地塞米松组晶状体谷胱甘肽含量和过氧化氢酶、谷胱甘肽还原酶及Na+-K+ATP酶活性呈时间依赖性下降。培养3d过氧化氢酶、谷胱甘肽还原酶和Na+-K+ATP酶活性与1d相比分别下降29.87%(P<0.01)、22.71%(P<0.05)、22.34%(P<0.01);培养5d,谷胱甘肽含量与1d相比下降30.62%(P<0.05);培养7d,过氧化氢酶活性、谷胱甘肽含量、谷胱甘肽还原酶活性和Na+-K+ATP酶活性分别比1d下降约85.47%(P<0.01)、53.63%(P<0.01)、79.68%(P<0.01)、75.37%(P<0.01)。
在低浓度肌肽治疗组,培养3d、5d、7dCAT活性较地塞米松组分别增加约24.10%(P<0.01)、47.96%(P<0.01)和79.93%(P<0.01),GR活性分别较地塞米松组增加约13.91%(P<0.05)、45.77%(P<0.01)和52.51%(P<0.01),Na+-K+ATP酶活性分别较地塞米松组增加约10.8%(P<0.01)、44.6%(P<0.01)和57.4%(P<0.01),培养5d和7d分别较地塞米松组增加约17.91%(P<0.05)和34.69%(P<0.01)。
在高浓度肌肽治疗组,培养3d、5d、7dCAT活性较地塞米松组增加约24.92%(P<0.01)、47.99%(P<0.01)和80.23%(P<0.01),GR活性分别较地塞米松组增加约14.52%(P<0.05)、45.58%(P<0.01)和56.28%(P<0.01),Na+-K+ATP酶活性分别较地塞米松组增加约11.3%(P<0.01)、45.7%(P<0.01)和57.6%(P<0.01);培养5d和7d分别较地塞米松组增加约20.35%(P<0.05)和36.30%(P<0.01)。
研究结论:肌肽通过保护抗氧化酶和Na+-K+ATP酶的功能抑制地塞米松诱导的大鼠晶状体白内障的形成。