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卵磷脂(Phosphatidylcholine,PC)是一类多功能的大分子活性物质,具有抗氧化、抗菌和降血脂等功能,对心血管疾病有预防作用。蛋黄卵磷脂(Egg yolk phosphatidylcholine,EPC)含量丰富,约占蛋黄总脂质的16-18%。研究表明,EPC能够改善高脂饮食引起的血清和肝脏脂质的积累,有助于消除肝脏氧化应激,改善肥胖和脂肪肝等相关疾病。然而相关调节机制仍不明确。因此,本课题以新鲜鸡蛋为原料,采用超声辅助乙醇的方法研究EPC的最优提取方法,并对其进行定性和定量分析,然后通过高脂饮食诱导小鼠建立代谢综合征(Metabolic Syndrome,MetS)模型,与大豆卵磷脂(Soybean phosphatidylcholine,SPC)对照,基于“肠-肝”轴代谢路径探究EPC摄入对MetS小鼠血脂代谢的调控作用及相关机制。主要研究内容和结果如下:1、超声辅助乙醇提取EPC的工艺优化。以新鲜蛋黄为原料,采用超声波辅助乙醇的方法提取EPC,考察了提取过程中超声功率、超声时间和β-环糊精(β-CD)浓度对EPC提取率和胆固醇去除率的影响,并在此基础上进行正交优化试验,获得最佳提取工艺参数。然后,采用超高效液相色谱法(UPLC)和傅里叶红外光谱法(FT-IR)对EPC的磷脂组成和含量进行分析。得到EPC的最佳制备条件为:超声功率200 W,β-CD浓度5 g/L,超声时间30 min。在此条件下EPC的提取率为89.54%,胆固醇的去除率为54.07%。通过红外分析证实所提取样品为EPC的最终产品,有较高的纯度。采用HPLC法分析EPC中磷脂组成,其中PC含量最高,达到81.14%,溶血磷脂酰胆碱(LPC)含量次之(11.14%)以及少量其它组分。2、通过高脂饮食喂养诱导C57BL/6小鼠建立MetS模型,基于脂质组学方法分析比较EPC和SPC对MetS小鼠血脂代谢的影响。研究表明,与HFD相比,EPC和SPC可显著降低附睾脂肪积累、血清和肝脏总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)的含量以及血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,同时显著提高血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,且EPC组较SPC组显著增加了50.4%(P<0.05)。EPC和SPC显著降低了肝脏丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,其值分别为28.8%和26.1%(P<0.05),且两组间无显著差异(P>0.05)。EPC组小鼠血清天冬氨酸转氨酶/丙氨酸转氨酶(AST/ALT)的值为1.31,显著低于HFD组(2.32),而SPC组AST/ALT的值显著高于HFD组(P<0.05),同时,EPC和SPC组肝脏AST/ALT值分别为1.31和2.72,显著低于HFD(P<0.05),且组间无显著差异(P>0.05)。EPC可有效缓解肝细胞中脂解空泡的形成并下调SREBP-1c、PPAR-α、CPT1b和TNF-α的表达。3、利用超高效液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)对小鼠血清和肝脏脂质组进行定性和定量分析,通过差异脂质找寻相关代谢通路。结果表明,血清中共检测到679种脂类代谢物,肝脏中共检测到904种脂类代谢物。利用OPLS-DA分析,发现在EPC组小鼠的血清中检测到有4种PE(PE(20:1_18:0)、PE(22:6_20:0)、PE(18:2_16:0)和PE(17:0_22:6))和9,10-DiHOME上调,而TXB2、LPI(16:0/0:0)和LPE(0:0/18:0)下调。另外,EPC可提高肝脏Cer和PE水平,且肝脏中有65种TG(包括TG(18:1_18:2_20:2)、TG(19:1_18:2_18:2)和TG(16:0_17:0_18:1)等)和19种DG(包括DG(18:1_20:0)、DG(18:1_20:3)和DG(18:0_22:5)等)在EPC组中显著下调(P<0.05)。结合EPC调控的生物标志物,总结了其可能影响的相关的代谢途径,其中甘油磷脂代谢是最相关的代谢途径。4、采用16S rDNA高通量测序技术对小鼠新鲜粪便进行测序分析。结果表明,与HFD组相比,EPC和SPC组均显著降低了Enterobacteria的相对丰度,且EPC组的Lachnospirales明显高于HFD组(P<0.05)。与SPC组相比,EPC处理降低了Bacteroides的丰度,而增加Lactobacillus的丰度。对微生物群落进行Alpha多样性分析发现,高脂饮食会降低群落的多样性。而饲喂卵磷脂可增加物种多样性,EPC组和SPC组的Shannon指数分别为HFD组的1.88和2.00倍。根据LDA分析丰度差异显著的物种,发现Muribaculaceae在SPC组中起重要作用,Lactobacillaceae、Lactobacillales和Bacilli在EPC组中发挥重要作用。通过差异代谢物和差异菌群的相关性分析发现,Firmicutes与血清SM、HexCer、CE和LDL-C水平呈显著负相关,而Bacilli、Lactobacillales和Bacteroidota与血清PC、HDL-C和PE水平呈显著正相关(P<0.05);同时发现Lactobacillales、Bacilli和Firmicutes与肝脏TG、DG和LPC水平呈显著负相关,而Proteobacteria和Enterobacteriales与肝脏PC和PE水平呈显著负相关(P<0.05)。总之,EPC能缓解高脂饮食所导致的脂质代谢紊乱,并对MetS发生具有有效的预防作用。