河豚毒素心脏停搏液用于离体大鼠心肌保护的实验研究

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目的: 研究河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)心脏停搏液对离体大鼠缺血/再灌注心肌在器官水平和细胞水平的保护作用,探索新的心肌保护方法。 方法: 实验Ⅰ. 取 Wistar 大鼠心脏建立 Langendorff 灌注模型和 Neely左心室工作灌注模型,分成 2 组:即 TTX 停搏组和 STH-2 停搏组。TTX组用 TTX 心脏停搏液停搏,STH-2 组用 St.Thomas No.2 cardioplegia(STH-2)停搏。停搏后将鼠心置于相应配伍的停搏液中,7℃保存 5小时后恢复灌注。观察停搏前和再灌注后各组心脏血液动力学、心肌酶学、能量物质腺苷酸含量和心肌超微结构等方面的改变。 实验Ⅱ. 用酶解法分离Wistar大鼠心脏获得具有搏动性的心室肌细胞悬液,随机分成基础组、STH-2 组和 TTX 组。基础组仅以 K-H 液处理,STH-2 组和 TTX 组分别应用 STH-2 和 TTX 心脏停搏液处理,建立模拟缺血/再灌注损伤的停搏/复搏心肌细胞模型,应用激光扫描共聚焦显微镜与荧光探针相结合的技术,测定各组心肌细胞不同时期的[Na+]i和[Ca2+]i。用倒置显微镜观察细胞搏动情况和形态学变化。 结果: 1.离体大鼠心脏 Langendorff 灌注模型停搏前两组之间的指标无
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